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龙图腾网获悉宁波大学申请的专利基于钆量子点爆炸式扩增策略的低场核磁共振均相免疫检测食源性致病菌的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115774103B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-24发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211418295.5，技术领域涉及：G01N33/569；该发明授权基于钆量子点爆炸式扩增策略的低场核磁共振均相免疫检测食源性致病菌的方法是由郭智勇;张冬雨;陈乐;励洪泽;邹庭浪;张洁;杨帆;郝婷婷;邬杨波;谢建军设计研发完成，并于2022-11-14向国家知识产权局提交的专利申请。

本基于钆量子点爆炸式扩增策略的低场核磁共振均相免疫检测食源性致病菌的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了基于钆量子点爆炸式扩增策略的低场核磁共振均相免疫检测食源性致病菌的方法，本方法不以诊断或治疗为目的，特点是包括以下步骤：1将食源性致病菌多克隆抗体通过偶联反应偶联到磁性氧化石墨烯表面得到捕获单元MGO@Ab；2将食源性致病菌多克隆抗体通过偶联反应偶联到球形灌木丛状PS@Gd‑CQDs复合物上得到信号单元PS@Gd‑CQDs@Ab复合物；3将PS@Gd‑CQDs@Ab、MGO@Ab和食源性致病菌样品混合制得捕获单元‑食源性致病菌‑信号单元三明治结构，通过低场核磁共振均相免疫检测测定未知样品中食源性致病菌浓度；优点是灵敏度和精确性高、特异性强且操作简单快速。

本发明授权基于钆量子点爆炸式扩增策略的低场核磁共振均相免疫检测食源性致病菌的方法在权利要求书中公布了：1.一种基于钆量子点爆炸式扩增策略的低场核磁共振均相免疫检测食源性致病菌的方法，本方法不以诊断或治疗为目的，其特征在于包括以下步骤： 1捕获单元MGO@Ab的合成 A．采用双溶剂法制备磁性氧化石墨烯，具体过程如下：将200~520mgFeCl3·6H2O、7mL乙二醇和13mL二乙二醇混合，室温搅拌10~30min溶解后，加入0.5~2.5g聚乙烯吡咯烷酮，120℃油浴搅拌至PVP溶解后，加入1~3g乙酸钠与5~30mg氧化石墨烯粉末，室温搅拌30min，将混合物转移至聚四氟乙烯反应釜内，在200℃下反应8~10h，获得的黑色沉淀，用水和乙醇清洗，并置于真空干燥箱内60℃烘干，即得到磁性氧化石墨烯； B．将食源性致病菌多克隆抗体通过EDCNHS偶联反应偶联到磁性氧化石墨烯表面，并用牛血清白蛋白封闭非特异性结合位点，即得到捕获单元MGO@Ab，具体过程如下：将12.2mg1-3-二甲氨基丙基-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、7.2mgN-羟基琥珀酰亚胺溶解在10mL0.5mgmLMGO分散液中，用0.01M盐酸调节pH=5.0，室温下搅拌30min，加入1.5mgmL食源性致病菌多克隆抗体溶液100μL，室温反应3h后，通过EDCNHS偶联反应，将食源性致病菌多克隆抗体组装在MGO上，再加入200µL2wt%BSA溶液以封闭非特异性结合位点，磁力清洗后，所得沉淀物分散在pH=7.4，10mL，0.01MPBS溶液中，即得到捕获单元MGO@Ab分散液； 2信号单元PS@Gd-CQDs@Ab的合成 A.将0.8~1.5g二乙基三胺五乙酸、0.1~0.3gGdCl3·6H2O和10mL水混合，超声分散10min，转移到聚四氟乙烯反应釜中，在200℃加热6~8h后，产物用水透析12h，每间隔3h换水一次，冷冻干燥后，即得到Gd-CQDs； B.将L-半胱氨酸通过EDCNHS偶联反应偶联到Gd-CQDs上，即得到巯基修饰的Gd-CQDs； C.将500~1000µL2.5mgmL羧基修饰的聚苯乙烯小球与12.2mgEDC、7.2mgNHS加入10mL乙醇中，室温下搅拌30min，加入200µL的乙二胺封端的聚乙烯亚胺，室温通过EDCNHS反应3h，将混合物以3405×g离心5~10min，并清洗后，分散在10mL含有10wt%的N，N-二甲基甲酰胺的pH=7.5，0.1MPBS溶液中，加入150~300µL0.01M琥珀酰亚胺3-2-吡啶基二硫基-丙酸酯，室温下反应1~3h，离心并洗涤后，重新分散在10mL含有10%的DMF的pH=8.0，0.1MPBS溶液中，加入1mL巯基Gd-CQDs分散液，并在4℃下反应8~10h，离心并洗涤，产物分散在10~20mL水中，即得到球形灌木丛状PS@Gd-CQDs复合物分散液； D.将食源性致病菌多克隆抗体通过EDCNHS偶联反应偶联到球形灌木丛状PS@Gd-CQDs复合物上，得到生物功能化的球形灌木丛状的PS@Gd-CQDs@Ab复合物； 3低场核磁共振均相免疫检测 取200μLPS@Gd-CQDs@Ab分散液和50~200μLMGO@Ab分散液、1mL待测食源性致病菌样品，加入样品瓶中混合，振摇孵育30~40min，磁吸分离获得捕获单元-食源性致病菌-信号单元三明治结构，将捕获单元-食源性致病菌-信号单元三明治结构加入到800μL50mM二硫苏糖醇溶液，反应20min，磁洗，加入200μL0.01M盐酸，反应5min，置于低场核磁共振造影剂驰豫分析仪，在35℃下采集T1，使用IR脉冲序列测量，测定一系列不同浓度的食源性致病菌对应的水质子的横向驰豫时间差值ΔT1的大小，建立水质子的纵向驰豫时间差值与食源性致病菌浓度之间的定量关系，根据该定量关系即可测定未知样品中食源性致病菌浓度，其中ΔT1的值由以下公式计算：ΔT1=T1negative–T1positive，其中T1为水质子的纵向驰豫时间，T1negative是无食源性致病菌时的平均T1，T1positive是有食源性致病菌时的平均T1。

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