杭州中赢生物医疗科技有限公司王冶陶获国家专利权
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龙图腾网获悉杭州中赢生物医疗科技有限公司申请的专利一种增加NK细胞冻存复苏后活性的方法及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116058363B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-28发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310038621.8，技术领域涉及：A01N1/162；该发明授权一种增加NK细胞冻存复苏后活性的方法及其应用是由王冶陶;彭昉;俞英豪设计研发完成，并于2023-01-13向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种增加NK细胞冻存复苏后活性的方法及其应用在说明书摘要公布了：本发明涉及一种增加NK细胞冻存复苏后活性的方法及其应用，所述方法包括：将待冻存的NK细胞于冻存前先与L‑脯氨酸和β‑巯基乙醇混合培养，然后再与NK细胞冻存液混合，得到细胞悬液，将细胞悬液置于无菌冻存管中，于液氮中冻存。本发明创造性地发现在冻存前的NK细胞培养阶段向培养体系中添加L‑脯氨酸和β‑巯基乙醇，能够使冻存复苏后仍保持较高的细胞存活率和杀伤能力。这种方法提供了一种冻存剂配方改良以外的NK细胞保存策略，可以减少冻存剂中二甲基亚砜等细胞保护剂的用量，使冻存液对冻存细胞和人体的毒性大大降低，以及降低成本。
本发明授权一种增加NK细胞冻存复苏后活性的方法及其应用在权利要求书中公布了：1.一种增加NK细胞冻存复苏后活性的方法，其特征在于，所述方法包括：将待冻存的NK细胞于冻存前先与L-脯氨酸和β-巯基乙醇混合培养，然后再与NK细胞冻存液混合，得到细胞悬液，将细胞悬液置于无菌冻存管中，于液氮中冻存； 所述NK细胞冻存液的组分包括：二甲基亚砜5-8％、人血白蛋白0.1-1％、聚乙二醇0.05-2％、右旋糖酐0.2-2％、维生素B12和生理盐水； 所述与L-脯氨酸和β-巯基乙醇混合培养于冻存前24-72h开始； 所述L-脯氨酸在混合培养体系中的浓度为100-2000μM，所述β-巯基乙醇在混合培养体系中的浓度为0.1-50μM； 所述维生素B12的浓度为5-50ngmL。
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