北京永泰生物制品有限公司王歈获国家专利权
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龙图腾网获悉北京永泰生物制品有限公司申请的专利一种质量稳定可控的扩增活化淋巴细胞的方法及其用于防治神经科疾病中的用途获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116355846B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211716258.2,技术领域涉及:C12N5/0783;该发明授权一种质量稳定可控的扩增活化淋巴细胞的方法及其用于防治神经科疾病中的用途是由王歈;邓声菊设计研发完成,并于2022-12-28向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种质量稳定可控的扩增活化淋巴细胞的方法及其用于防治神经科疾病中的用途在说明书摘要公布了:本发明涉及一种活化扩增淋巴细胞原液的制备方法,包括下述步骤:1将自体外周全血离心提取获得的外周血单个核细胞PBMC与淋巴细胞活化剂置于无血清培养基中共培养,完成淋巴细胞的培养活化,所述无血清培养基选自KBM581、GT‑T551H3的任一种或其组合;2将步骤1制得的培养活化淋巴细胞置于无血清培养基中,进行传代培养,制得淋巴细胞活化培养物;3在步骤2传代培养获得的淋巴细胞活化培养物中加入其体积5‑10倍的无血清培养基,进行扩增培养,扩增培养代数为1‑5代;4离心,洗涤,收集活化扩增的淋巴细胞,即得。本发明制得的活化扩增淋巴细胞用于防治神经科疾病患者,利于改善并增强患者的身体控制力且使其头脑更清醒,显著减轻小脑共济失调患者的头晕、行动不便等症状,显著提高了患者的生活质量并加速患者康复,显著提高免疫细胞治疗的靶向性和精准性,并显著提高患者的依从性。
本发明授权一种质量稳定可控的扩增活化淋巴细胞的方法及其用于防治神经科疾病中的用途在权利要求书中公布了:1.一种活化扩增淋巴细胞原液的制备方法,包括下述步骤: 1将自体外周全血离心提取获得的外周血单个核细胞PBMC与淋巴细胞活化剂置于无血清培养基中,再将其置于37.0℃±1.0℃、7.5%±1.0%CO2条件下培养,制得活化淋巴细胞,其中,单个核细胞的制备包括下述步骤:在抗凝处理的全血中加入分离介质和稀释剂,搅拌,混匀,将其加至分离液中,离心1000-3000rpm*10-40min,收集分界面间细胞层,加入洗涤液,离心,洗涤,收集细胞,即得,其中,所述分离介质选自羟乙基淀粉40氯化钠注射液、Percoll、Ficoll-PaquePLUS的任一种或其组合,全血:稀释剂的体积比为1:1-2,所述稀释剂选自氯化钠注射液、Hank’s缓冲液、LactatedRinger’s溶液、Dulbecco's磷酸盐缓冲液的任一种或其组合,所述分离液选自羟乙基淀粉40氯化钠注射液、Ficoll、Lymphoprep、LymphocyteSeparationMedia、CellSeparationMedia的任一种或其组合,所述分离液的渗透压为300mOsmolkg-360mOsmolkg,所述洗涤液选自0.1%人血白蛋白氯化钠注射液、Dulbecco's磷酸盐缓冲液、氯化钠注射液的任一种或其组合;单个核细胞在无血清培养基中的起始密度为0.2-1.6×106个ml;所述淋巴细胞活化剂选自抗人CD3抗体或将其固化在载体上的含抗体载体的任一种;所述无血清培养基选自KBM581、GT-T551H3的任一种或其组合,无血清培养基中含有300-600IUml的细胞因子IL-2; 2将步骤1制得的活化淋巴细胞用无血清培养基重悬至细胞密度为0.5-5×106个ml,再将其置于37.0℃±1.0℃、7.5%±1.0%CO2条件下传代培养1-5代,制得活化传代淋巴细胞,其中,所述无血清培养基选自KBM581、GT-T551H3的任一种或其组合; 3在步骤2制得的活化传代淋巴细胞中加入其体积5-10倍的无血清培养基,再将其置于37.0℃±1.0℃、7.5%±1.0%CO2条件下扩增培养1-5代,制得活化扩增淋巴细胞,其中,所述无血清培养基选自KBM581、GT-T551H3的任一种或其组合; 4离心,洗涤,收集活化扩增的淋巴细胞,即得。
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