黑龙江飞鹤乳业有限公司;中国科学院化学研究所;飞鹤(哈尔滨)乳品有限公司高鹏获国家专利权
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龙图腾网获悉黑龙江飞鹤乳业有限公司;中国科学院化学研究所;飞鹤(哈尔滨)乳品有限公司申请的专利蛋白质水解度检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116973477B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310937165.0,技术领域涉及:G01N30/02;该发明授权蛋白质水解度检测方法是由高鹏;王象欣;赵玲玉;赵镇文;解庆刚;蒋士龙;张永久;冷友斌;徐飞;陆思宇;耿培忠设计研发完成,并于2023-07-27向国家知识产权局提交的专利申请。
本蛋白质水解度检测方法在说明书摘要公布了:本发明涉及一种蛋白质水解度检测方法,本发明基于三硝基苯磺酸浓度的标准曲线,并且通过蛋白质水解前后消耗的三硝基苯磺酸的量的差,从而依据上述标准曲线以确定水解出的氨基,进而计算蛋白质的水解度。
本发明授权蛋白质水解度检测方法在权利要求书中公布了:1.一种检测蛋白质水解度的方法,所述方法包括提供对象蛋白质,以及提供所述对象蛋白质经水解而得到的水解物,其特征在于, 所述方法还包括: 三硝基苯磺酸的标准曲线的建立的步骤,使用液相色谱-质谱检测系统,基于不同浓度的三硝基苯磺酸的质谱峰的面积而建立所述标准曲线; 所述对象蛋白质消耗的三硝基苯磺酸的检测的步骤,将对象蛋白质与已知量的三硝基苯磺酸反应,之后使用所述液相色谱-质谱检测系统检测剩余的三硝基苯磺酸的质谱峰面积,并借助所述标准曲线确定对象蛋白质所消耗的三硝基苯磺酸的量A0; 所述水解物消耗的三硝基苯磺酸的检测的步骤,将水解物与已知量的三硝基苯磺酸反应,之后使用所述液相色谱-质谱检测系统检测剩余的三硝基苯磺酸的质谱峰面积,并借助所述标准曲线确定所述水解物所消耗的三硝基苯磺酸的量A1, 通过所述A0与A1的关系计算所述对象蛋白质的水解度, 其中,所述对象蛋白质消耗的三硝基苯磺酸的检测的步骤中的液相色谱-质谱检测时的检测试样中以干重计的对象蛋白质的质量为B0,所述水解物消耗的三硝基苯磺酸的检测的步骤中的液相色谱-质谱检测时的检测试样中以干重计的水解物的质量为B1,则在所述水解中产生B1的所需的对象蛋白的质量以干重计为B1’,进而B0与B1’存在可换算关系, 所述方法各个步骤中的液相色谱-质谱检测系统的检测条件实质上相同, 所述液相色谱-质谱检测系统中液相色谱工作条件为: 色谱柱:WatersCSHC18反相柱,其规格为1.7μm,2.1mmID×100mm,温度设置为40℃, 流动相A是超纯水,流动相B是纯乙腈,流速400μLmin,分离时长每个样品4min,梯度洗脱参数如下: 10.0-1.0min,10%B-10%B; 21-2.8min,10%B-98%B; 32.8-3.2min,98%B-98%B; 43.2-3.3min,98%B-10%B; 53.3-4.0min,10%B-10%B。
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