北京纳通生命科学技术有限公司陈亚男获国家专利权
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龙图腾网获悉北京纳通生命科学技术有限公司申请的专利一种用于细胞种属鉴别和交叉污染检测的引物组合及其使用方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117535424B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311517362.3,技术领域涉及:C12Q1/6888;该发明授权一种用于细胞种属鉴别和交叉污染检测的引物组合及其使用方法是由陈亚男;金雷;张会闪设计研发完成,并于2023-11-14向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种用于细胞种属鉴别和交叉污染检测的引物组合及其使用方法在说明书摘要公布了:本申请涉及分子遗传学领域,具体涉及一种用于细胞种属鉴别和交叉污染检测的引物组合及其使用方法。该引物组合包含引物对Pig‑COXI、Human‑COXI、Cat‑COXI、Sheep‑COXI、Horse‑COXI、Monkey‑COXI、Rat‑COXI、Mouse‑COXI、Goat‑COXI、和Cow‑COXI。该引物组合特异性强,在一个PCR体系中,以包含10种不同种属细胞的待测细胞样本的核酸为模板进行扩增,能够得到10条相应的目的条带,并且灵敏度高,应用简单高效,因此具有良好的拓展性,可以作为细胞质量控制方法应用于生产细胞基质和治疗性细胞产品的质量控制。
本发明授权一种用于细胞种属鉴别和交叉污染检测的引物组合及其使用方法在权利要求书中公布了:1.一种细胞种属鉴别和交叉污染检测的方法,包括: 步骤S1.采用以下引物组合对待测细胞样本的核酸进行PCR扩增;和 步骤S2.表征PCR扩增的产物中的DNA片段,并根据所述表征结果确定待测细胞样本是否包含一种或多种种属为猪、人、猫、绵羊、马、绿猴、大鼠、小鼠、山羊或牛的细胞, 其中所述PCR扩增的体系包含终浓度为10-3至50ngμL的模板, 其中所述引物组合具有如SEQIDNO.11至SEQIDNO.30所示序列,并用于在同时含有上述十个来源的混合种属细胞中,同时鉴别不同种属细胞并同时检测是否存在不同种属细胞的污染, 其中所述核酸为总DNA; 其中所述步骤S2包括: 当所述PCR扩增产物中不含有472bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本不包含种属为猪的细胞,当含有472bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本包含种属为猪的细胞; 当所述PCR扩增产物中不含有425bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本不包含种属为人的细胞,当含有425bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本包含种属为人的细胞; 当所述PCR扩增产物中不含有341bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本不包含种属为猫的细胞,当含有341bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本包含种属为猫的细胞; 当所述PCR扩增产物中不含有271bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本不包含种属为绵羊的细胞,当含有271bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本包含种属为绵羊的细胞; 当所述PCR扩增产物中不含有243bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本不包含种属为马的细胞,当含有243bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本包含种属为马的细胞; 当所述PCR扩增产物中不含有222bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本不包含种属为绿猴的细胞,当含有222bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本包含种属为绿猴的细胞; 当所述PCR扩增产物中不含有177bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本不包含种属为大鼠的细胞,当含有177bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本包含种属为大鼠的细胞; 当所述PCR扩增产物中不含有139bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本不包含种属为小鼠的细胞,当含有139bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本包含种属为小鼠的细胞; 当所述PCR扩增产物中不含有117bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本不包含种属为山羊的细胞,当含有117bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本包含种属为山羊的细胞;和 当所述PCR扩增产物中不含有102bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本不包含种属为牛的细胞,当含有102bp的DNA片段时,判定所述待测细胞样本包含种属为牛的细胞。
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