广西壮族自治区药用植物园张占江获国家专利权
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龙图腾网获悉广西壮族自治区药用植物园申请的专利积雪草离体保存方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118000100B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202410359571.8,技术领域涉及:A01H4/00;该发明授权积雪草离体保存方法是由张占江;张坤;覃雅;李林轩;李倩;丘卓秋;韦树根;李翠;雷明;潘丽梅;谭桂玉;万凌云;韦莹;霍娟设计研发完成,并于2024-03-27向国家知识产权局提交的专利申请。
本积雪草离体保存方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种积雪草离体保存方法,包括以下步骤:获取积雪草瓶苗,并将积雪草瓶苗接种至第三培养基中进行离体保存培养,其中,第三培养基包括12MS、0.01‑0.03mgL6‑苄氨基嘌呤、0.6‑1.4mgL青鲜素、0.2‑0.8mgL多效唑、0.2‑0.8gL活性炭。获取积雪草瓶苗的方法为:获取积雪草无菌外植体,并将积雪草无菌外植体接种至第一培养基进行诱导培养,得到诱导芽,再将诱导芽接种至第二培养基进行壮苗培养,得到积雪草瓶苗。本发明通过改变培养条件及培养基成分,可有效延长积雪草离体保存时间。
本发明授权积雪草离体保存方法在权利要求书中公布了:1.积雪草离体保存方法,其特征在于,包括以下步骤: 获取积雪草瓶苗,并将积雪草瓶苗接种至第三培养基中进行离体保存培养,其中,第三培养基由以下组分组成:12MS、0.01-0.03mgL6-苄氨基嘌呤、0.6-1.4mgL青鲜素、0.2-0.8mgL多效唑、0.2-0.8gL活性炭; 将积雪草瓶苗移栽至第三培养基之前,先使用无菌浸泡液浸泡瓶苗根部8h,其中,无菌浸泡液的制备方法为:取熟地花花瓣粉碎,得到粉碎料,向粉碎料中加入粉碎料20倍量的水并回流6-7h,过滤,得到滤液;向滤液中加入滤液总质量0.2倍量的芦荟、滤液总质量0.2倍量的梧桐花、滤液总质量0.7倍量的橄榄叶,置于22-23℃条件下非封闭发酵48h,然后向体系中加入滤液总质量0.1倍量的枯草芽孢杆菌液、滤液总质量0.2倍量的红茶菌菌液封闭发酵5d,最后再非封闭发酵2d,即得到浸泡液,使用0.22μm的微孔滤膜对浸泡液过滤灭菌得到无菌浸泡液; 在使用无菌浸泡液浸泡积雪草瓶苗之前,取部分无菌浸泡液进行浓缩,得到浓缩液,并使用0.22μm的微孔滤膜对浓缩液过滤灭菌,将浓缩液加入第三培养基中,第三培养基中浓缩液的浓度为1mgL; 在第三培养基中培养的条件包括:在第三培养基中培养的第一个月,每天白天的培养温度为20-22℃,光照强度为1000LX,夜间培养温度为10-11℃;从第二个月起培养两个月,每天白天的培养温度为18-20℃,光照强度为1200LX,夜间培养温度为12-14℃,从第四个月起培养三个月,每天白天的培养温度为18-20℃,光照强度为1800LX,夜间培养温度为15-17℃;从第七个月起,每天白天的培养温度为22-23℃,光照强度为1500LX,夜间培养温度为17-19℃。
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