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南京工业大学孙文俊获国家专利权

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龙图腾网获悉南京工业大学申请的专利一种表面展示普鲁兰酶的重组菌及其构建方法与应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119639640B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411724504.8,技术领域涉及:C12N1/21;该发明授权一种表面展示普鲁兰酶的重组菌及其构建方法与应用是由孙文俊;任培芳;陈勇;陈天鹏;应汉杰;周超伟;董奇伟设计研发完成,并于2024-11-28向国家知识产权局提交的专利申请。

一种表面展示普鲁兰酶的重组菌及其构建方法与应用在说明书摘要公布了:本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种表面展示普鲁兰酶的重组菌及其构建方法与应用。以枯草芽孢杆菌为底盘菌株,利用淀粉样纤维蛋白tasA或分选酶锚定普鲁兰酶,构建得到了一种表面展示普鲁兰酶的重组菌。利用该重组菌株在连续发酵、连续催化生产普鲁兰酶中,无需提取和纯化胞外普鲁兰酶,无需再利用物理或者化学方法进行酶固定化,大幅度减少了多步操作过程中带来的酶活损失,并且该方法结合生物膜连续化发酵的优点使得表面展示酶活复苏,不会像传统固定化方式酶活越来越低。带来高收益,低成本,节约资源,减少环境污染等优点,该方法也为以后普鲁兰酶的催化提供新思路。

本发明授权一种表面展示普鲁兰酶的重组菌及其构建方法与应用在权利要求书中公布了:1.一种表面展示普鲁兰酶的重组菌,其特征在于,以枯草芽孢杆菌为底盘菌株,利用分选酶锚定普鲁兰酶,构建得到所述表面展示普鲁兰酶的重组菌; 其中,所述底盘菌株为168Δ7菌株或168Δ7ΔA::CAH-tasA菌株; 其中,所述分选酶包括srtA、ywpE、yhcS中的任意一种; 其中,所述分选酶srtA特异性识别LPETG基序中的LPETG2或LPETG3,所述分选酶ywpE特异性识别LPDTA基序中的LPDTA3,所述分选酶yhcS特异性识别LPDTS基序中的LPDTS1、或LPDTS2、或LPDTS3; 其中,所述168Δ7ΔA::CAH-tasA菌株为168Δ7菌株敲除了短链β-1,4-半乳糖寡糖β-半乳糖苷酶基因ganA,整合表达了单氰胺水合酶基因CAH,并过表达了淀粉样纤维蛋白基因tasA得到的; 其中,所述分选酶srtA、分选酶ywpE、分选酶yhcS,其氨基酸序列依次如SEQIDNO.3、SEQIDNO.9、SEQIDNO.16所示; 其中,所述LPETG2、LPETG3,其核苷酸序列依次如SEQIDNO.6~7所示;所述LPDTA3,其核苷酸序列如SEQIDNO.13所示;所述LPDTS1、LPDTS2、LPDTS3,其核苷酸序列依次如SEQIDNO.18~20所示; 其中,所述短链β-1,4-半乳糖寡糖β-半乳糖苷酶基因ganA,其核苷酸序列如SEQIDNO.24所示;所述单氰胺水合酶基因CAH,其核苷酸序列如SEQIDNO.25所示;所述淀粉样纤维蛋白基因tasA,其核苷酸序列如SEQIDNO.2所示; 其中,所述表面展示普鲁兰酶的重组菌按照如下方法构建:将含有分选酶基因的表达质粒、含有分选酶对应基序基因和普鲁兰酶基因的表达质粒共转化到底盘菌株的感受态细胞中,构建得到所述表面展示普鲁兰酶的重组菌;所述含有分选酶对应基序基因和普鲁兰酶基因的表达质粒,是先利用一步克隆法连接普鲁兰酶基因和分选酶对应基序基因得到融合蛋白。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人南京工业大学,其通讯地址为:210009 江苏省南京市鼓楼区新模范马路5号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。

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