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龙图腾网获悉良渚实验室申请的专利一种核酸探针对及单分子检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120519560B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-28发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202511031964.7，技术领域涉及：C12Q1/6876；该发明授权一种核酸探针对及单分子检测方法是由唐政敏;潘勤伟;王永成;陈倩倩设计研发完成，并于2025-07-25向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种核酸探针对及单分子检测方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种核酸探针对及单分子检测方法，该核酸探针对包括一条具有发卡构象的环状发卡探针和一条具有触发功能的线性单链探针，本发明在探针体系中引入空间构象调控机制，采用环状发卡探针在游离状态下封闭关键识别区，避免其被聚合酶误识别或与非特异寡核苷酸形成延伸复合物，正确信号的生成需依次满足抗体邻位结合、一级配对、结构解锁与二级延伸的空间与序列条件，多重门控极大抬高背景激活阈值。更重要的是，非特异配对即便偶发生成中间产物d‑a‑b，但因不包含完整扩增模板不包含C区亦无法被平台识别，从而从机制上抑制了假阳性信号生成，信噪比控制能力强，背景极低。

本发明授权一种核酸探针对及单分子检测方法在权利要求书中公布了：1.一种核酸探针对，其特征在于，包括一条具有发卡构象的环状发卡探针和一条具有触发功能的线性单链探针，所述的环状发卡探针包括用于形成内部稳定的发卡结构的B1区、E区和C区，以及用于提供链置换与延伸反应的触发点的A1区和B2区； 环状发卡探针是一条呈闭环结构的部分双链寡核苷酸，环状发卡探针和线性单链探针中各区域分别为： A1区：包括处于环状发卡探针中的a′单链，为触发第一次链置换和延伸反应的初始配对区； A2区：包括处于线性单链探针3′端的a单链，a单链与a′单链互补以触发第一次链置换和延伸反应； B1区：包括处于环状发卡探针中的bb′互补双链，构成初始闭合结构，且其中的b′单链即作为第一次链置换和延伸反应的模板； B2区：包括处于环状发卡探针中的b′′单链，该b′′单链与b′单链分别处于a′单链的两端，二者序列相同但延伸方向相反，b′′单链为触发第二次链置换和延伸反应的关键配对区； C区：包括处于环状发卡探针中的cc′互补双链，其中的c′单链即作为第二次链置换和延伸反应的模板，且包含了扩增模板的引物结合位点，c单链上连接有用于偶联第一亲和试剂的柔性连接段； D区：包括处于线性单链探针5′端的d单链，d单链不与任何区域互补，仅作为扩增模板的一部分，其中含有扩增模板的引物结合位点；d单链的5′端用于偶联第二亲和试剂； E区：能够调控链置换DNA聚合酶的延伸终点，作为第一次链置换与延伸反应和第二次链置换与延伸反应的“终止阻断段”发挥作用；A2区与A1区互补以触发第一次链置换与延伸反应，形成d-a-b延伸链，在E区的终止作用下，d-a-b延伸链无法继续延伸并从环状发卡探针上脱离，成为中间体d-a-b单链； 随后，中间体d-a-b单链中的b链与环状发卡探针上外露的b′′单链配对，引发第二次链置换和延伸反应，解锁C区，形成d-a-b-c延伸链，在E区的终止作用下，d-a-b-c延伸链无法继续延伸并从环状发卡探针上脱离，从而获得扩增模板d-a-b-c单链。

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