江南大学刘龙获国家专利权
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龙图腾网获悉江南大学申请的专利一种胞外转运番茄红素的酿酒酵母菌株构建及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115975830B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-04发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211004881.5,技术领域涉及:C12N1/19;该发明授权一种胞外转运番茄红素的酿酒酵母菌株构建及其应用是由刘龙;陈坚;吕雪芹;堵国成;李江华;刘延峰;刘家恒设计研发完成,并于2022-08-22向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种胞外转运番茄红素的酿酒酵母菌株构建及其应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种胞外转运番茄红素的酿酒酵母菌株构建及其应用,属于发酵工程技术领域。本发明构建了一株强化番茄红素胞外分泌能力的重组酿酒酵母菌株,所述重组酿酒酵母强化表达了截短3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶、异戊烯基焦磷酸异构酶、法尼基焦磷酸合酶、内质网大小调节因子INO2、NADH激酶POS5和ABC转运蛋白Snq2;异源表达香叶基香叶基二磷酸合酶、八氢番茄红素脱氢酶、双功能番茄红素环化酶八氢番茄红素合酶突变体CrtYBM1W61R;敲除酿酒酵母中的ROX1、EXG1和GAL80基因;并且回补乳清酸苷5'‑磷酸脱羧酶的表达;对其进行摇瓶发酵时,该菌株胞外番茄红素含量达到12.58mgL,提高至出发菌株的16.5倍,因此具有广阔的应用前景。
本发明授权一种胞外转运番茄红素的酿酒酵母菌株构建及其应用在权利要求书中公布了:1.一种重组酿酒酵母,其特征在于,所述重组酿酒酵母强化表达了截短的3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶tHMG1、异戊烯基焦磷酸异构酶IDI1、法尼基焦磷酸合酶ERG20、内质网大小调节因子INO2、NADH激酶POS5和ABC转运蛋白Snq2;并异源表达了Taxusxmedia来源的香叶基香叶基二磷酸合酶CrtE、Blakesleatrispora来源的八氢番茄红素脱氢酶CrtI、Phaffiarhodozyma来源的双功能番茄红素环化酶八氢番茄红素合酶CrtYB的突变体CrtYBM1;同时敲除了麦角甾醇生物合成ERG基因的转录抑制因子ROX1、葡聚糖1,3-β-葡萄糖苷酶EXG1和半乳糖乳糖代谢调节蛋白GAL80;并且对乳清酸苷5'-磷酸脱羧酶URA3进行了回补; 所述重组酿酒酵母利用PGPD启动子表达tHMG1,利用PPGK1启动子表达INO2,利用PTEF1启动子表达ERG20和IDI1,利用PGAL1,10双向启动子表达CrtI和CrtE,利用PGAL7启动子表达POS5并异源表达CrtYBM1,利用PTDH3启动子表达Snq2,利用PURA3启动子表达URA3; 所述PGPD启动子的核苷酸序列如SEQIDNO.8所示,所述PPGK1启动子的核苷酸序列如SEQIDNO.9所示,PTEF1启动子的核苷酸序列如SEQIDNO.10所示,PGAL1,10双向启动子的核苷酸序列如SEQIDNO.11所示,所述PGAL7启动子的核苷酸序列如SEQIDNO.12所示,所述PTDH3启动子的核苷酸序列如SEQIDNO.13所示,所述PURA3启动子的核苷酸序列如SEQIDNO.14所示; 以酿酒酵母SaccharomycescerevisiaeBY4741为出发菌株; 所述tHMG1的GeneID为42650,所述IDI1的GeneID为855986,所述ERG20的GeneID为853272,所述INO2的GeneID为851701,所述POS5的GeneID为855913,所述Snq2蛋白的GeneID为851574,所述CrtE的GenInfoIdentifier号为45505274,所述CrtI的GenInfoIdentifier号为37729024,所述CrtYB的GenBank号为ALK24266.1,所述ROX1的GeneID为856178,所述EXG1的GeneID为851007,所述GAL80的GeneID为854954,所述URA3的GeneID为856692;所述突变体CrtYBM1是在CrtYB基础上,将61位的色氨酸突变成精氨酸W61R;所述截短的3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶tHMG1是在tHMG1的基础上,截短N端530个氨基酸。
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