江南大学刘立明获国家专利权
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龙图腾网获悉江南大学申请的专利一种代谢工程改造大肠杆菌生产富马酸的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116103213B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-04发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310047372.9，技术领域涉及：C12N1/21；该发明授权一种代谢工程改造大肠杆菌生产富马酸的方法是由刘立明;孟欣;陈修来;刘佳;高聪;郭亮;宋伟;吴静设计研发完成，并于2023-01-31向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种代谢工程改造大肠杆菌生产富马酸的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种代谢工程改造大肠杆菌生产富马酸的方法，属于发酵领域。本发明在大肠杆菌E.coliFMME‑N‑5中敲除富马酸酶基因、富马酸还原酶基因、天冬氨酸酶基因和乳酸脱氢酶基因，并过表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因和琥珀酸脱氢酶编码基因。所得菌株E.coliFMME‑N‑5△fumB△frdBC△aspA△ldhA‑ppc‑sdhCDAB用于发酵生产富马酸，在7.5L发酵罐上发酵65h，富马酸产量达到45gL，生产强度为0.69gLh，富马酸对葡萄糖得率为0.52gg，副产物甲酸不积累，琥珀酸、乳酸、乙酸积累量均低于1gL，具有一定的工业生产潜力。
本发明授权一种代谢工程改造大肠杆菌生产富马酸的方法在权利要求书中公布了：1.一种生产富马酸的大肠杆菌工程菌株，其特征在于，所述大肠杆菌工程菌株被敲除富马酸酶基因fumB、富马酸还原酶基因frdBC、天冬氨酸酶基因aspA和乳酸脱氢酶基因ldhA，并过量表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因ppc和琥珀酸脱氢酶基因sdhCDAB； 所述富马酸酶基因fumB的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；所述富马酸还原酶基因frdBC的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示；所述天冬氨酸酶基因aspA的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示；所述乳酸脱氢酶基因ldhA的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示；所述磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因ppc的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示；所述琥珀酸脱氢酶基因sdhCDAB的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示； 所述大肠杆菌工程菌株的宿主为大肠杆菌FMME-N-5，保藏号为CCTCCNO:M20200454。
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