南方医科大学田元新获国家专利权
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龙图腾网获悉南方医科大学申请的专利一种无酶恒温核酸扩增系统及其在mRNA检测中的应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116144741B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-04发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310031793.2,技术领域涉及:C12Q1/6844;该发明授权一种无酶恒温核酸扩增系统及其在mRNA检测中的应用是由田元新;梁鹏英;孙蒙旭;杨子中;李铜;郭铭琪;段文军;谢宝平;陈金香;陈俊设计研发完成,并于2023-01-10向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种无酶恒温核酸扩增系统及其在mRNA检测中的应用在说明书摘要公布了:本发明属于核酸检测与细胞成像技术领域,公开了一种无酶恒温核酸扩增系统及其在mRNA检测中的应用。该无酶恒温核酸扩增系统包括发卡H1、发卡H2和双链H3L;双链H3L由L链和H3链组成;发卡H1、发卡H2标记有可发生荧光共振能量转移的荧光供体和荧光受体;在目标核酸存在情况下,发卡H1与发卡H2发生催化发卡自组装反应,形成H1‑H2复合物;H1‑H2复合物可与双链H3L中反应并置换得到发卡H3;发卡H3可引发发卡H1与发卡H2发生催化发卡自组装反应,形成H1‑H2复合物。采用该无酶恒温核酸扩增系统进行mRNA检测,可有效提高检测和成像的灵敏度,并具有反应时间短、灵敏度高和特异性强的特点。
本发明授权一种无酶恒温核酸扩增系统及其在mRNA检测中的应用在权利要求书中公布了:1.一种无酶恒温核酸扩增系统,其特征在于,包括发卡H1、发卡H2和双链H3L;所述双链H3L由L链和H3链组成; 所述发卡H1、发卡H2分别标记有可发生荧光共振能量转移的荧光供体和荧光受体; 在目标核酸存在情况下,引发所述发卡H1与所述发卡H2发生催化发卡自组装反应,形成H1-H2复合物并置换得到目标核酸;所述H1-H2复合物可与所述双链H3L中L链结合并置换得到发卡H3; 所述发卡H3进一步引发所述发卡H1与所述发卡H2发生催化发卡自组装反应,形成H1-H2复合物并置换得到发卡H3; 当待测体系中含有目标核酸target时,发卡H1被打开与目标核酸target形成双链H1-target;而被打开的H1暴露出一段能与H2茎互补的单链,发卡H2随之被打开并与之结合形成H1-H2复合物,H1和H2上的荧光供体和荧光受体因为相互靠近,能够诱发荧光能量共振转移,产生荧光信号;并使得目标核酸target以链置换的形式将其置换出来,置换出的目标核酸target可继续促进上述反应的进行,实现循环使用; 由于发卡H1的3’端和发卡H2的5’端各修饰了一段与L链互补的序列,当H1-H2复合物形成后,H1-H2复合物上与L互补的部分可近似为一条完整的长链并能够从双链H3L置换出H3,形成稳定的络合物长链,而游离的H3能自发形成发卡结构;此时发卡H3两端的序列可近似为与目标核酸序列相同的长链,可充当目标核酸target的类似物与发卡H1形成双链H1-H3,而被打开的H1暴露出一段能与H2茎互补的单链,发卡H2随之被打开并与之结合形成H1-H2复合物,H1和H2上的荧光供体和荧光受体因为相互靠近,能够诱发荧光能量共振转移,产生荧光信号;并使得发卡H3以链置换的形式将其置换出来,置换出的发卡H3可继续促进上述反应的进行,实现循环使用。
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