中国科学院动物研究所;北京干细胞与再生医学研究院李伟获国家专利权
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龙图腾网获悉中国科学院动物研究所;北京干细胞与再生医学研究院申请的专利一种编辑核酸的系统及方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN113913405B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-07发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202110780360.8,技术领域涉及:C12N9/22;该发明授权一种编辑核酸的系统及方法是由李伟;周琪;王晨鑫;方森;焦贯怡设计研发完成,并于2021-07-09向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种编辑核酸的系统及方法在说明书摘要公布了:本申请涉及用于编辑核酸的系统和试剂盒及其用途,以及编辑核酸的方法。本申请的系统、试剂盒和方法可用于断裂双链靶核酸并在其末端形成悬突,并且可用于在感兴趣的核酸分子例如基因组DNA中插入靶核酸或将感兴趣的核酸分子例如基因组DNA中的核苷酸片段置换为靶核酸。
本发明授权一种编辑核酸的系统及方法在权利要求书中公布了:1.一种编辑核酸的系统或试剂盒,其包含: 1第一Cas蛋白或含有编码所述第一Cas蛋白的核苷酸序列的核酸分子A1,其中,所述第一Cas蛋白能够切割或断裂第一双链靶核酸; 2依赖于模板的第一逆转录酶或含有编码所述第一逆转录酶的核苷酸序列的核酸分子B1; 3含有第一gRNA和第一标签引物的第一PegRNA,或者,含有编码第一PegRNA的核苷酸序列的核酸分子;其中, 所述第一gRNA能够与所述第一Cas蛋白结合,并形成第一功能性复合物;所述第一功能性复合物能够将第一双链靶核酸的两条链断裂,形成断裂的靶核酸片段; 所述第一标签引物含有第一标签序列和第一靶结合序列,所述第一标签序列位于所述第一靶结合序列的上游或5’端;并且,在允许核酸杂交或退火的条件下,所述第一靶结合序列能够杂交或退火至所述断裂的靶核酸片段的一条核酸链的3’端,形成双链结构,且,所述第一标签序列不与所述靶核酸片段结合,处于游离的单链状态; 4第二Cas蛋白或含有编码所述第二Cas蛋白的核苷酸序列的核酸分子A2,其中,所述第二Cas蛋白能够切割或断裂第二双链靶核酸; 5含有第二gRNA和第二标签引物的第二PegRNA,或者,含有编码第二PegRNA的核苷酸序列的核酸分子;其中, 所述第二gRNA能够与第二Cas蛋白结合,并形成第二功能性复合物;所述第二功能性复合物能够将第二双链靶核酸的两条链断裂,形成断裂的靶核酸片段;所述第二标签引物含有第二标签序列和第二靶结合序列,所述第二标签序列位于所述第二靶结合序列的上游或5’端;并且,在允许核酸杂交或退火的条件下,所述第二靶结合序列能够杂交或退火到所述断裂的靶核酸片段的一条核酸链的3’端,形成双链结构,且,所述第二标签序列不与所述靶核酸片段结合,处于游离的单链状态; 6第二逆转录酶或含有编码所述第二逆转录酶的核苷酸序列的核酸分子B2; 7第三Cas蛋白或含有编码所述第三Cas蛋白的核苷酸序列的核酸分子A3,其中,所述第三Cas蛋白能够切割或断裂第三双链靶核酸; 8第三gRNA或含有编码所述第三gRNA的核苷酸序列的核酸分子C3,其中,所述第三gRNA能够与第三Cas蛋白结合,并形成第三功能性复合物;所述第三功能性复合物能够将第三双链靶核酸的两条链断裂,形成断裂的核苷酸片段a1和a2; 并且,所述第一逆转录酶能够以第一标签引物为模板,延伸所述核酸链的3’端,并形成第一悬突;所述第二逆转录酶能够以第二标签引物为模板,延伸所述核酸链的3’端,并形成第二悬突;并且,在允许核酸杂交或退火的条件下,所述第一悬突能够与断裂的核苷酸片段a1杂交或退火,所述第二悬突能够与断裂的核苷酸片段a2杂交或退火; 其中,所述第二双链靶核酸与所述第一双链靶核酸是相同的,所述第二功能性复合物与所述第一功能性复合物在不同的位置断裂所述相同的双链靶核酸;并且,所述第一悬突和第二悬突包含于相同的靶核酸片段上,且彼此位于相对的核酸链上; 其中,所述第三Cas蛋白、第二Cas蛋白与第一Cas蛋白为Cas9蛋白;所述第二逆转录酶与所述第一逆转录酶相同或者不同。
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