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龙图腾网获悉南京理工大学申请的专利基于配体浓度梯度驱动磷脂膜化学趋向的亲和分析方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116223467B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-07发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310174754.8，技术领域涉及：G01N21/64；该发明授权基于配体浓度梯度驱动磷脂膜化学趋向的亲和分析方法是由邓盛元;卓西勇;李斌;高可教;吴莹;陈嘉亮;肖明设计研发完成，并于2023-02-28向国家知识产权局提交的专利申请。

本基于配体浓度梯度驱动磷脂膜化学趋向的亲和分析方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种基于配体浓度梯度驱动磷脂膜化学趋向的亲和分析方法。所述的亲和分析方法可以在不需要标记目标分子的情况下分析磷脂膜界面上的亲和作用。通过微流控系统建立磷脂膜界面上方的配体梯度，而磷脂分子将作为受体将受到配体结合作用的驱动，磷脂膜通过电荷和化学特异性相互作用来指导磷脂分子的微米级趋向运动。在这种情况下，磷脂受体的趋向运动将慢慢进行，直到熵和其他分子间作用力完全平衡。通过染料标记受体磷脂，并观测膜中受体分子聚集的最终状态，结合数理统计，便可进行配受体之间微妙和瞬态相互作用的定量表征。

本发明授权基于配体浓度梯度驱动磷脂膜化学趋向的亲和分析方法在权利要求书中公布了：1.一种基于配体浓度梯度驱动磷脂膜化学趋向的亲和分析方法，其特征在于，该方法基于微流控芯片实现，所述微流控芯片用作反应室，包括PDMS器件和盖玻片，二者无缝粘合；所述PDMS器件设有3个液体入口、1个液体出口和1个液体通道；包括以下步骤： 1配制单层脂质体溶液和含特定配体的缓冲溶液； 所述单层脂质体溶液是通过冻融挤出法制备的，具体为：将含有NBD染料的磷脂溶于缓冲溶液中，经多次冻融过程形成大单层脂质体，再经多次脂质体挤出器挤出，最终形成粒径均一的单层脂质体溶液； 将特定配体溶于缓冲溶液中，形成含特定配体的缓冲溶液；所述特定配体为钙离子、镁离子或Tim-3蛋白； 2将步骤1中配制好的脂质体溶液从微流控芯片的液体出口处通入，使其充满微流控芯片，孵育30-60min，经破裂融合形成磷脂膜； 3分别从微流控芯片的三个液体入口以相同的流速通入缓冲溶液，持续20-40min，以冲洗磷脂膜上方剩余的脂质体； 4将从中间的液体入口通入的缓冲溶液替换为含特定配体的缓冲溶液，且多次替换浓度逐渐升高的含特定配体的缓冲溶液，两侧的缓冲溶液的流速均不变，含特定配体的缓冲溶液的流速与两侧的缓冲溶液的流速保持一致，从而在微流控通道中形成配体浓度梯度；由LED光源激发特定磷脂产生荧光，使用显微镜观察，并经物镜传输至sCMOS相机，定时拍摄微流控通道中的荧光分布，最后通过NISElements软件处理分析并进行数值拟合；包括： 定义一个物理量η用于量化磷脂在膜内的趋向运动； 定义为测得荧光强度的最小值近似于为背景噪声值： Iαx为在微分单元内的荧光强度： Aα为中间通道的荧光积分面积： 为所有通道的荧光积分面积： 其中，x的距离范围为0≤x≤L，L为通道宽度，x表示横向位置；为总荧光强度； 并基于计算出解离平衡常数KD；B对应高配体浓度时的最大聚集程度，cligand指配体浓度。

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