杭州联川生物技术股份有限公司陈天翔获国家专利权
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龙图腾网获悉杭州联川生物技术股份有限公司申请的专利一种制备爬行纲动物单细胞的试剂盒和方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115820535B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-11发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211460397.3，技术领域涉及：C12N5/071；该发明授权一种制备爬行纲动物单细胞的试剂盒和方法是由陈天翔;吴莹亮;殷楠楠设计研发完成，并于2022-11-17向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种制备爬行纲动物单细胞的试剂盒和方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种制备爬行纲动物单细胞的试剂盒和方法，属于单细胞测序技术领域。所述试剂盒包括CollagenaseⅠ、DNaseⅠ、Dispase和DMEM培养基。本发明的试剂盒和方法填补了爬行纲动物尤其是扬子鳄组织单细胞制备技术的空白。试剂盒成分简单，易于制备，方法有很高的重复性和成功率，能够得到大量高活率、杂质低的单细胞，可用于单细胞测序及更多应用领域。
本发明授权一种制备爬行纲动物单细胞的试剂盒和方法在权利要求书中公布了：1.一种制备爬行纲动物单细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤： S1，将CollagenaseⅠ和DNaseⅠ预加入至DMEM培养基中，终浓度分别为1mgmL和0.5mgmL； S2，获得所述爬行纲动物的组织样本，并剪切成1mm3大小的小块，转移至步骤S1获得的含有CollagenaseⅠ和DNaseⅠ的DMEM培养基中； S3，转移到恒温摇床中，30~35℃，60~100rpm振荡5~20min； S4，取出混匀，加入终浓度为0.5mgmLDispase，放回恒温摇床，消化10~30min； S5，将培养基过30μm筛，收集清液，8~15℃、280~400g离心3~10min，弃尽上清，沉淀用缓冲液重悬，得到第一细胞悬液； S6，用适量DMEM培养基洗下筛上的剩余组织，加入2倍体积0.25%胰酶，30~35℃，60~100rpm振荡5~20min，重复步骤S5，得到第二细胞悬液， 将所述第一细胞悬液和所述第二细胞悬液混合， 其中，所述爬行纲动物为扬子鳄，所述组织为胚胎性腺组织。
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