华南农业大学沈兴获国家专利权
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龙图腾网获悉华南农业大学申请的专利CRISPR-免疫联合小分子检测探针制备及检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119199128B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-11发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411207221.6，技术领域涉及：C12N15/11；该发明授权CRISPR-免疫联合小分子检测探针制备及检测方法是由沈兴;黄颖茵;郑佳乐;雷红涛;赵岗;李向梅;徐振林设计研发完成，并于2024-08-30向国家知识产权局提交的专利申请。
本CRISPR-免疫联合小分子检测探针制备及检测方法在说明书摘要公布了：本发明具体涉及了一种CRISPR‑免疫联合小分子检测探针制备及其相关检测方法和用途。探针制备主要采用一种化学生物偶联方法，用双功能交联剂4‑N‑马来酰亚胺甲基环己烷‑1‑羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐Sulfo‑SMCC和N‑琥珀酰亚胺基‑S‑乙酰硫基乙酸酯SATA，将5’端修饰‑NH2的dsDNA和单克隆抗体共价偶联制备成dsDNA‑抗体探针。其次，本检测方法以dsDNA‑抗体探针作为桥梁将免疫系统和CRISPRCas12a系统结合，利用抗体对小分子的特异性识别能力，并借助RPA核酸扩增进行信号放大及CRISPRCas12a的顺式切割活性和或反式单链DNA切割活性产生荧光信号，实现免疫反应信号向高强度荧光信号的转变，建立了CRISPR‑免疫联合小分子检测体系。所述检测方法操作简单、特异性强、灵敏度极高且信号稳定等优点。
本发明授权CRISPR-免疫联合小分子检测探针制备及检测方法在权利要求书中公布了：1.一种dsDNA-抗体探针，包括抗体和靶标dsDNA，其特征在于：所述抗体为任意单克隆抗体，所述dsDNA为长度100-300bp的、且序列中含有PAM位点“TTTV”的靶标dsDNA，两者经马来酰亚胺-巯基偶联方法合成dsDNA-抗体探针，其中靶标dsDNA序列由四部分组成，包括：与抗体进行连接的长度为5-10bp的连接臂序列、含有PAM位点“TTTV”和与crRNA互补的靶标序列的序列、提供给Cas12a酶crRNA复合物足够结合空间的序列以及RPA引物识别序列，所述靶标dsDNA的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示。
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