中国人民解放军总医院海南医院王文佳获国家专利权
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龙图腾网获悉中国人民解放军总医院海南医院申请的专利一种神经干细胞与小胶质细胞共培养培养基及共培养方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120738118B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-11发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511249963.X,技术领域涉及:C12N5/0797;该发明授权一种神经干细胞与小胶质细胞共培养培养基及共培养方法是由王文佳;高谋;陈鹏宇;王文硕;陈昱周;周玉会设计研发完成,并于2025-09-03向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种神经干细胞与小胶质细胞共培养培养基及共培养方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种神经干细胞与小胶质细胞共培养培养基及共培养方法,属于细胞共培养技术领域。其包括基础培养基、双模式脂质体以及以下组分:B‑27无血清添加剂不含维生素A、GlutaMAX添加剂、N‑乙酰半胱氨酸以及抗坏血酸‑2‑磷酸盐;其中,双模式脂质体包括生长因子脂质体和pH响应脂质体。本发明针对神经干细胞与小胶质细胞共培养的核心痛点,突破传统游离因子脉冲式添加的浓度波动缺陷,开发了双模式脂质体递送系统,通过双模式脂质体递送系统提升了细胞因子作用的稳定性,解决了传统游离因子脉冲式补加造成的浓度波动难题,实现稳定递送,使共培养的细胞存活率明显提升。
本发明授权一种神经干细胞与小胶质细胞共培养培养基及共培养方法在权利要求书中公布了:1.一种神经干细胞与小胶质细胞共培养培养基,其特征在于,包括基础培养基、双模式脂质体以及以下终浓度的组分: 0.5~3.5%不含维生素A的B-27无血清添加剂、0.5~2.5%GlutaMAX添加剂、0.01~1.5mMN-乙酰半胱氨酸以及85~120μM抗坏血酸-2-磷酸盐; 所述基础培养基为DMEMF12培养基; 所述双模式脂质体为生长因子脂质体和pH响应脂质体; 所述生长因子脂质体为EGF脂质体和bFGF脂质体,以生长因子用量计,两者终浓度均为12~22ngmL; 所述生长因子脂质体的制备方法如下: 1以质量比为3~5:1的比例称取大豆卵磷脂和胆固醇,溶解后超声,获得均匀的溶液; 2将生长因子溶液预热至45±1℃,然后使其与步骤1获得溶液以体积比为3~5:1的比例混合,于45±1℃搅拌30~40min,再使用旋转蒸发仪处理50~60min,然后通过透析获得生长因子脂质体;所述生长因子为EGF和bFGF; 所述pH响应脂质体为M-CSF脂质体和IL-34脂质体,以细胞因子用量计,两者终浓度均为12~22ngmL; 所述pH响应脂质体的制备方法如下: S1、以摩尔比5~6:3~4:0.5~1的比例称取二油酰基磷脂酰乙醇胺、胆固醇半琥珀酸酯和胆固醇,溶解后超声,获得均匀的溶液; S2、将细胞因子溶液预热至45±1℃,然后使其与步骤S1获得溶液以体积比为3~5:1的比例混合,于45±1℃搅拌30~40min,再使用旋转蒸发仪处理50~60min,然后通过透析获得pH响应脂质体;所述细胞因子为M-CSF和IL-34。
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