康立泰生物医药(青岛)有限公司王建刚获国家专利权
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龙图腾网获悉康立泰生物医药(青岛)有限公司申请的专利一种增强型抗肿瘤NK细胞及其制备方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115505572B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-14发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202110690836.9,技术领域涉及:C12N5/10;该发明授权一种增强型抗肿瘤NK细胞及其制备方法和应用是由王建刚;韩倩;胡祥维;王媛媛;吴明远设计研发完成,并于2021-06-22向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种增强型抗肿瘤NK细胞及其制备方法和应用在说明书摘要公布了:本发明提供一种增强型抗肿瘤NK细胞及其制备方法和应用。制备方法包括:构建获得IL‑12慢病毒表达载体;构建获得CD19‑CAR慢病毒表达载体;分别与慢病毒包装质粒共转染进293T细胞培养;分别收集和浓缩得到IL‑12慢病毒和CD19‑CAR慢病毒;培养传代NK‑92细胞,将CD19‑CAR慢病毒和IL‑12慢病毒按照相同的MOI共同感染NK‑92细胞,培养收集细胞,获得增强型抗肿瘤NK细胞。该NK细胞不仅能够识别自分泌IL‑12促进其增殖和分泌IFN‑γ增强对肿瘤的杀伤作用;而且局部靶向分泌直接作用于肿瘤微环境,不再需要外源IL‑12的加入,能够避免全身注射所引起的机体不良副反应。
本发明授权一种增强型抗肿瘤NK细胞及其制备方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种增强型抗肿瘤NK细胞的制备方法,其包括以下步骤: 将人工合成的IL-12基因连接到慢病毒载体质粒上,构建获得IL-12慢病毒表达载体; 将人工合成的CD19-CAR基因连接到慢病毒载体质粒上,构建获得CD19-CAR慢病毒表达载体; 将IL-12慢病毒表达载体、CD19-CAR慢病毒表达载体分别与慢病毒包装质粒共转染进293T细胞中并培养,分别收集获得富含IL-12慢病毒颗粒、CD19-CAR慢病毒颗粒的细胞上清液;浓缩后分别收集获得IL-12慢病毒和CD19-CAR慢病毒; 培养传代NK-92细胞,将CD19-CAR慢病毒和IL-12慢病毒按照相同的MOI值共同感染NK-92细胞,培养收集细胞,获得增强型抗肿瘤NK细胞; 所述CD19-CAR基因是将人CD8α信号肽基因、靶向CD19单链抗体基因、人CD8α铰链区基因、人CD8α跨膜区基因、4-1BB的胞内区基因、人CD3ζ胞内信号肽基因连接后进行密码子优化获得的。
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