中国海关科学技术研究中心杨宇获国家专利权
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龙图腾网获悉中国海关科学技术研究中心申请的专利一种检测双酚A的荧光免疫层析试纸及其制备方法与应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116087523B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-14发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211542591.6,技术领域涉及:G01N33/577;该发明授权一种检测双酚A的荧光免疫层析试纸及其制备方法与应用是由杨宇;赵婷婷;宋悦谦;刘莉;孙震;聂聪;侯宝翠设计研发完成,并于2022-12-02向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种检测双酚A的荧光免疫层析试纸及其制备方法与应用在说明书摘要公布了:本发明提供了一种检测双酚A的荧光免疫层析试纸及其制备方法与应用,试纸条由样本垫、荧光标记物垫、包被垫和吸水纸依次搭接粘贴在PVC底板上获得,所述荧光标记物垫为包被有荧光微球标记鼠抗双酚A单克隆抗体的玻璃纤维膜,所述包被垫为包被有羊抗鼠IgG多克隆抗体作为质控线和包被双酚A抗原复合物为检测线的硝酸纤维素膜。该试纸条检测过程操作简单,可自行进行检测,检测双酚A的灵敏度高,达到0.05ngmL;对双酚酸、双酚S、对苯二酚和邻羟基苯甲酸的检测为阴性,说明特异性较好。所述试纸还具有较好的稳定性,可有效保存14个月;每次检测过程可在10min内完成,能够快速检测样品,适用于现场快速检测。
本发明授权一种检测双酚A的荧光免疫层析试纸及其制备方法与应用在权利要求书中公布了:1.一种检测双酚A的荧光免疫层析试纸,其特征在于,其由样本垫、荧光标记物垫、包被垫和吸水纸依次搭接粘贴在PVC底板上获得,所述荧光标记物垫为包被有荧光微球标记鼠抗双酚A单克隆抗体的玻璃纤维膜,所述包被垫为包被有羊抗鼠IgG多克隆抗体作为质控线和包被双酚A抗原复合物为检测线的硝酸纤维素膜; 所述双酚A抗原复合物由如下制备方法获得:将双酚A、NHS、EDC溶于DMF中,避光反应后,得到A溶液,将A溶液逐滴加入BSA溶液中,搅拌均匀后室温下避光反应12h,得到B溶液,B溶液在6000rmin离心5min,取上清液装入透析袋置于pH7.4,0.01molL的PBS中,4℃透析,每隔12h换液1次,48h后获得含有双酚A抗原复合物;荧光标记物垫由如下制备方法获得:将MES缓冲液稀释的EDC和NHS各加入100μg到1mL的荧光微球中,避光进行活化30min后,将荧光微球12000rpm离心10min后弃上清,加入标记缓冲液复溶微球0.5mL,并且同时加入鼠抗双酚A单克隆抗体0.75mg搅拌反应,反应45min,在反应后的标记缓冲液中加入含2mgmL的BSA水溶液0.5mL,进行封闭30min后,12000rpm离心10min后弃上清,用硼酸盐清洗液经多次清洗标记后的鼠抗双酚A单克隆抗体的荧光微球,得到荧光微球标记抗体,以标记稀释液稀释按50倍稀释后喷涂玻璃纤维膜上作为荧光标记物垫,置干燥箱37℃烘干4小时,获得荧光标记物垫;其中,标记缓冲液为硼酸盐缓冲液,其为含有终浓度为0.015molL的硼酸钠和0.15molL的氯化钠的水溶液,pH8.5中加入体积百分含量为0.05%的TX-100; 所述羊抗鼠IgG多克隆抗体的包被浓度为2.2mgmL;所述双酚A抗原复合物的包被浓度为1.3mgmL;包被时采用的包被缓冲液为pH为8.0,含质量百分比为2.5%海藻糖的0.01M磷酸盐缓冲液,来分别稀释羊抗鼠IgG多克隆抗体和双酚A抗原复合物。
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