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龙图腾网获悉江苏大学;成都大熊猫繁育研究基地申请的专利一种新型变异盖塔病毒的实时荧光定量PCR检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116590470B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-14发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310380470.4，技术领域涉及：C12Q1/70；该发明授权一种新型变异盖塔病毒的实时荧光定量PCR检测方法是由张文;鲍思雯;刘颂蕊;赵敏;李运莉;张洪文;杨世兴;杨奎兴;沈权;王晓春;纪立凯;刘雨薇设计研发完成，并于2023-04-11向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种新型变异盖塔病毒的实时荧光定量PCR检测方法在说明书摘要公布了：本发明属于病毒检测技术领域，具体涉及一种新型变异盖塔病毒的实时荧光定量PCR检测方法。本发明根据GETAstructuralpolyprotein的基因序列设计并合成特异性引物，构建重组质粒pcDNA3.1HA‑GETA‑E1，作为标准品建立了标准曲线，建立了针对新型变异盖塔病毒的实时荧光定量PCR检测体系，实现新型变异盖塔病毒GETA的定量检测，对HSV等多种病毒无特异性扩增；能够检测到101copiesμL的重组质粒，是常规PCR的1000倍；组内重复的最大变异系数为1.59%，组间重复的最大变异系数为3.30%。具有特异性和敏感性高、重复性好及耗时短的优点。弥补了对新型变异盖塔病毒检测的技术空白，为诊断新型变异盖塔病毒感染提供依据，在保护小熊猫及大熊猫方面发挥重要作用，具有很好的应用前景。

本发明授权一种新型变异盖塔病毒的实时荧光定量PCR检测方法在权利要求书中公布了：1.一种非诊断目的的新型变异盖塔病毒的实时荧光定量PCR检测方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤： 1根据GenBank序列号为MZ357111的新型变异盖塔病毒的structuralpolyprotein基因序列，与不同宿主来源的GETA核酸序列使用GeneiousPrime软件进行序列比对，根据比对结果，选择病毒的特异序列区域设计特异性引物GETA-q和GETA-E1；GETA-q的上游引物为GETA-qPF，下游引物为GETA-qPR；GETA-E1的上游引物为GETA-E1-PF，下游引物为GETA-E1-PR；其核苷酸序列分别如SEQIDNO:1~SEQIDNO:4所示； 2以步骤1的新型变异盖塔病毒的RNA为模板进行逆转录得到cDNA，采用步骤1设计的引物GETA-E1-PF和GETA-E1-PR进行PCR扩增，回收PCR产物获得目的基因E1的DNA片段，通过同源重组的方法与酶切后线性化的质粒载体pcDNA3.1HA连接，转化到DH5α大肠杆菌感受态细胞中，挑取阳性克隆提取质粒，获得重组质粒pcDNA3.1HA-GETA-E1标准品； 3将重组质粒pcDNA3.1HA-GETA-E1进行10倍倍比稀释制备得到重组质粒标准品溶液，并以其为模板，采用特异性引物GETA-qPF和GETA-qPR进行SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR，以重组质粒标准品的拷贝数浓度的对数值为横坐标，Ct值为纵坐标，得到线性回归方程y=-3.1972x+36.698，相关系数为0.9983； 4提取待测样本的总核酸，得到待测样本的cDNA，并作为模板，采用特异性引物GETA-qPF和GETA-qPR进行SYBRⅠ实时荧光定量PCR，并将获得的Ct值带入步骤3的线性回归方程，实现待测样本中新型变异盖塔病毒的定量检测。

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