北京林业大学杜庆章获国家专利权
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龙图腾网获悉北京林业大学申请的专利一种与杨树根系生长发育相关的基因PagSKP2a及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120249313B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-14发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510468171.5,技术领域涉及:C12N15/29;该发明授权一种与杨树根系生长发育相关的基因PagSKP2a及其应用是由杜庆章;张东海;吕晨飞;何玉玲;张梦娇;袁明佳设计研发完成,并于2025-04-15向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种与杨树根系生长发育相关的基因PagSKP2a及其应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种与杨树根系生长发育相关的基因PagSKP2a,该基因的编码区核苷酸包括如SEQIDNO.1所示的序列,过表达该基因可显著提高杨树生根速率、主根长度和侧根数量,其对于选育易生根、根系发达的杨树植株和杨树种质资源创新具有重要意义。本发明还公开了促进杨树根系生长发育的育种方法及基因PagSKP2a在筛选易生根、根系发达的杨树品种方面的应用,其能够直接用于杨树根系生长发育相关的分子辅助育种,有效缩短杨树育种周期。
本发明授权一种与杨树根系生长发育相关的基因PagSKP2a及其应用在权利要求书中公布了:1.一种促进杨树根系生长发育的育种方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤: 步骤I,获得PagSKP2a基因,构建过量表达重组载体和基因敲除重组载体; 基因PagSKP2a的编码区核苷酸序列如SEQIDNO.1所示,其编码蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示; 所述过量表达重组载体的基础载体为pBI121载体,所述基因敲除重组载体为CRISPRCas9双元载体; 基因敲除重组载体的构建方法包括以下步骤: 步骤1,基于PagSKP2a基因的编码区序列,设计基因敲除靶点; 所述靶点为PagSKP2a-1和PagSKP2a-2,其核苷酸序列分别如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示; 步骤2,构建gRNA表达盒; 步骤2包括第一轮PCR扩增和第二轮PCR扩增,在第一轮PCR中,gRNA表达盒的构建引物包括U-F、AtU3dT1、gRNA-R、gRT1、AtU3bT2、gRT2, 所述引物AtU3dT1的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示,所述引物gRT1的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示,所述引物AtU3bT2的核苷酸序列如SEQIDNO.7所示,所述引物gRT2的核苷酸序列如SEQIDNO.8所示,引物U-F的核苷酸序列如SEQIDNO.9所示,引物gRNA-R的核苷酸序列如SEQIDNO.10所示; 步骤3,将表达盒连接至CRISPRCas9双元载体,获得PagSKP2a基因敲除重组载体; 步骤II,进行PagSKP2a基因的遗传转化,检测过量表达转基因植株和基因敲除突变体植株; 步骤III,对过量表达转基因植株和基因敲除突变体植株进行表型分析,获得杨树根系生长发育增强的植株; 杨树根系生长发育增强的植株为过量表达PagSKP2a基因的植株,与野生型杨树植株的根系生长发育相比,过量表达PagSKP2a基因杨树植株的生根速率更高、主根长度更长、侧根数量更多。
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