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龙图腾网获悉中国农业科学院植物保护研究所申请的专利一种pCAMBIA1300-miniRNA3-BC-NLPPya载体和构建方法及其在高抗黄瓜花叶病毒中的应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120505357B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-14发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510722705.2，技术领域涉及：C12N15/82；该发明授权一种pCAMBIA1300-miniRNA3-BC-NLPPya载体和构建方法及其在高抗黄瓜花叶病毒中的应用是由李方方;李召雷;张婧;卢若滨;周雪平设计研发完成，并于2025-05-30向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种pCAMBIA1300-miniRNA3-BC-NLPPya载体和构建方法及其在高抗黄瓜花叶病毒中的应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种pCAMBIA1300‑miniRNA3‑BC‑NLPPya载体和构建方法及其在高抗黄瓜花叶病毒中的应用，该载体是将miniRNA3‑BC‑NLPPya构建到pCAMBIA1300载体骨架，其中miniRNA3‑BC和NLPPya基因序列如SEQIDNO:2和5所示。本发明发现了miniRNA3‑BC‑NLPPya能够高效抑制CMV的侵染，有效减弱CMV造成的危害，而且不需要施加任何药物，是一种高效、绿色的抗病技术，可以为防控黄瓜花叶病毒及其相似病毒提供新的策略。

本发明授权一种pCAMBIA1300-miniRNA3-BC-NLPPya载体和构建方法及其在高抗黄瓜花叶病毒中的应用在权利要求书中公布了：1.一种pCAMBIA1300-miniRNA3-BC-NLPPya载体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤： 1以人工合成miniRNA3-BC为模版，使用引物FR-miniRNA3得到一段特异的PCR条带；将PCR目的条带构建到SacI和BamHI线性化的pCAMBIA1300载体中，得到含pCAMBIA1300-miniRNA3-BC载体；其中，miniRNA3-BC如SEQIDNO:2所示；FR-miniRNA3的序列如SEQIDNO：6-7所示； F-miniRNA3：GAAGTTCATTTCATTTGGAGAGGgtaatcttaccactgtgtgtgtg R-miniRNA3：TACGAACGAAAGCTCGGATCCagctctcccttagccatccg；2以人工合成的NLPPya为模版，使用引物F-NLPPyaR-NLPPya扩增NLPPya核苷酸序列，得到一段特异的PCR条带；其中，NLPPya序列如SEQIDNO：5所示；F-NLPPyaR-NLPPya其序列如SEQIDNO：11-12所示： F-NLPPya：aattgagtcgagtcACGCGTATGGTGAGGTTTGTTAGCGCATTG R-NLPPya：ctgggaacacggaaTCTAGATCATTGAAAGAAAGCCTTCACGAGTTTATC 将NLPPya的PCR片段构建到MluI和XbaI线性化的pCAMBIA1300-miniRNA3-BC载体中，得到含有pCAMBIA1300-miniRNA3-BC-NLPPya的载体。

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