浙江理工大学任梓铭获国家专利权
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龙图腾网获悉浙江理工大学申请的专利一种基于石蒜减数分裂细胞蛋白免疫荧光染色的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120628743B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-14发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511136762.9,技术领域涉及:G01N1/30;该发明授权一种基于石蒜减数分裂细胞蛋白免疫荧光染色的方法是由任梓铭;王敬茹;黄楠;蔡逸飞;姚荷霞;谢绪艳;胡翔设计研发完成,并于2025-08-14向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于石蒜减数分裂细胞蛋白免疫荧光染色的方法在说明书摘要公布了:本发明属于生物技术领域,公开了一种基于石蒜减数分裂细胞蛋白免疫荧光染色的方法,所述方法包括如下步骤:1对固定好的花药进行处理,得到处于减数分裂时期的花粉母细胞;2用酶处理,使减数分裂细胞细胞质分解;3用处理好的减数分裂细胞进行制片及荧光染色;4在荧光显微镜下观察目的蛋白的定位信号。本发明使用葡聚糖酶等处理花粉母细胞,使石蒜花粉母细胞外层较厚的胼胝质保护层有效分解,有利于抗体与染色体的结合;同时改善制片方法,有效增强荧光信号的表达。该方法对利用免疫荧光定位技术研究石蒜处于减数分裂时期的花粉母细胞中具有不同功能的蛋白质的亚细胞定位有重要意义。
本发明授权一种基于石蒜减数分裂细胞蛋白免疫荧光染色的方法在权利要求书中公布了:1.一种基于石蒜减数分裂细胞蛋白免疫荧光染色的方法,其特征在于,包括以下步骤: S1、获取石蒜减数分裂细胞:固定石蒜减数分裂时期花芽,分离花药并挤出花粉母细胞; S2、两阶段酶解处理: 第一阶段:将花粉母细胞用葡聚糖酶液浸泡酶解; 第二阶段:经清洗后,再用混合酶液浸泡酶解; 所述混合酶液中的酶为细胞解旋酶、纤维素酶和果胶酶; 所述葡聚糖酶液的质量浓度为2.5%; 所述混合酶液的质量浓度为0.3%,溶解于10mM,pH为4.5的柠檬酸缓冲液,其中,细胞解旋酶、纤维素酶和果胶酶的比例为1∶1∶1; S3、酶解后的细胞涂片固定; S4、依次孵育一抗和荧光标记二抗; S5、封片后荧光显微镜观察。
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