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龙图腾网获悉华南生物医药研究院;广州伯尼兹生物科技有限公司申请的专利一种提高哺乳动物细胞狂犬病毒VLP蛋白表达量的生产方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118812670B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-18发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202410900069.3，技术领域涉及：C07K14/145；该发明授权一种提高哺乳动物细胞狂犬病毒VLP蛋白表达量的生产方法是由毛莹莹;颜仁和;万鹏飞;李红卫;何跃忠;李堪贺;马曼欣;梁铁坤;林玥媚;杨国强;帅丽芳;何敏杰设计研发完成，并于2024-07-05向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种提高哺乳动物细胞狂犬病毒VLP蛋白表达量的生产方法在说明书摘要公布了：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种提高哺乳动物细胞狂犬病毒VLP蛋白表达量的生产方法。该方法包括步骤：S1种子细胞接种及培养：将表达狂犬病毒VLP蛋白的哺乳动物细胞种子细胞在摇瓶中利用无血清培养液培养后，接种至生物反应器中，继续用无血清培养液培养；S2蛋白收获及换液：待细胞生长参数和培养液参数达到要求时，收集培养液上清，同时加入等量的新的培养液，直至细胞生长参数达不到要求参数时，收集所有培养液离心后取上清。该方法使用生物反应器全悬浮无血清培养和批量收获相结合生产狂犬病毒VLP，有效提高细胞的表达水平，降低了疫苗的制造成本，为实现疫苗的规模化生产奠定了基础。

本发明授权一种提高哺乳动物细胞狂犬病毒VLP蛋白表达量的生产方法在权利要求书中公布了：1.一种提高哺乳动物细胞狂犬病毒VLP蛋白表达量的生产方法，其特征在于，包括如下步骤： S1：种子细胞接种及培养：将表达狂犬病毒VLP蛋白的哺乳动物细胞种子细胞在摇瓶中利用无血清培养液培养后，接种至生物反应器中，继续用无血清培养液培养； 所述无血清培养液为添加了8mmolLL-谷氨酰胺的HEK293细胞全悬浮无血清培养液，其中还含有4mM谷氨酰胺、6gL葡萄糖、1.5gLPF68； 所述生物反应器为激流式生物反应器，生物反应器中培养条件为：培养温度：37-37.5℃，细胞培养pH：7.0-7.5，细胞培养DO：40％-80％，转速：50-100rpm；并每天添加葡萄糖至培养液中浓度达到4gL，从第2天开始隔天流加补料； S2：蛋白收获及换液：待细胞生长参数和培养液参数达到要求时，收集培养液上清，同时加入等量的新的培养液， 细胞生长参数要求为：细胞密度≥1E+7个ml、活率≥80％、且直径为16-18μm；培养液参数要求为满足以下3个条件：①葡萄糖消耗每天大于2gL、②乳酸浓度高于20mmolL、③L-谷氨酰胺的含量小于2mmolL；每次收集占整个培养液体积12-34的培养液上清，并换入等量新的培养液； 直至细胞生长参数达不到要求参数时，收集所有培养液离心后取上清。

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