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龙图腾网获悉良渚实验室申请的专利一种用于组织原位蛋白免疫荧光循环染色及数据分析的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119985006B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-18发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411650738.2，技术领域涉及：G01N1/30；该发明授权一种用于组织原位蛋白免疫荧光循环染色及数据分析的方法是由刘冲;张成夫;王凯;靳凯哲;田安好;卡依赛尔·阿布都肉苏力设计研发完成，并于2024-11-19向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种用于组织原位蛋白免疫荧光循环染色及数据分析的方法在说明书摘要公布了：本发明提供了一种用于组织原位蛋白免疫荧光循环染色及数据分析的方法，属于生物检测领域。该方法具体步骤为：S1.制备样本组织切片；S2.荧光染色；S3.洗脱：采用爱必信abs994洗脱液洗脱；S4.循环染色：在洗脱完成后，根据检测目的蛋白重复进行步骤S2～S3进行循环染色；在每次染色结束后获得荧光染色图像；S5.细胞核图像识别；S7.多轮图像配准；S8.基于重合面积的抗体阳性细胞筛选与连通性分割：通过不同抗体的分布特性，基于与特定细胞核的重叠面积、环绕关系以及不同抗体之前的排斥关系，对不同细胞身份进行划分，可实现对多个蛋白的原位检测。

本发明授权一种用于组织原位蛋白免疫荧光循环染色及数据分析的方法在权利要求书中公布了：1.一种用于组织原位蛋白免疫荧光循环染色及数据分析的方法，其特征在于，包括以下步骤： S1.制备样本组织切片； S2.荧光染色； S3.洗脱： 将抗体洗脱液加热后滴加到荧光染色的组织切片上室温摇床；然后吸走抗体洗脱液，再次滴加抗体洗脱液，将载玻片密封，水浴处理；然后吸走抗体洗脱液，使用磷酸盐缓冲液清洗； S4.循环染色： 在洗脱完成后，根据检测目的蛋白重复进行步骤S2～S3进行循环染色；在每次染色结束后获得荧光染色图像； S5.细胞核图像识别： 每轮循环染色，待最后一次染色洗脱完成后，将组织切片使用DAPI对细胞核进行染色，在z轴方向最大密度投影后使用Cellpose方法的预训练模型对细胞核图像在2D层面进行分割，获取细胞蒙版及编号，并使用细胞核面积进行质控筛选，剔除边界划分错误的细胞核； S6.抗体图像的差异化强化： 将循环染色中获得的不同抗体的图像进行去噪便于后续抗体阳性区域的划分； S7.多轮图像配准： 多轮图像配准使用基于特征的配准方法，以每一轮次DAPI通道图像为基准计算轮次间的变换关系，并以单应性矩阵的形式迁移运用至同一轮次其余抗体通道，实现抗体信号的空间配准； S8.基于重合面积的抗体阳性细胞筛选与连通性分割： 通过不同抗体的分布特性，基于与特定细胞核的重叠面积、环绕关系以及不同抗体之前的排斥关系，对不同细胞身份进行划分。

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