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龙图腾网获悉南昌大学第一附属医院申请的专利基于双向负载模块的通用工程外泌体构建方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120519522B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-18发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202511013338.5，技术领域涉及：C12N15/867；该发明授权基于双向负载模块的通用工程外泌体构建方法是由刘伟;周力智;傅斌;胡接平;袁宇洋设计研发完成，并于2025-07-23向国家知识产权局提交的专利申请。

本基于双向负载模块的通用工程外泌体构建方法在说明书摘要公布了：本发明涉及外泌体修饰技术领域，具体提供了基于双向负载模块的通用工程外泌体构建方法。包括以下步骤：构建包括融合蛋白的编码基因的质粒表达载体；所述融合蛋白包括：蛋白CD63及其N端携带的标签蛋白，插入至蛋白CD63的第二胞外环中的Catcher，位于CD63蛋白C端的结构模块，包括：多聚碱性膜内锚定结构域、柔性连接肽、λ噬菌体来源的N‑peptide结构域；质粒表达载体包装慢病毒并纯化后导入哺乳动物细胞中，筛选获得稳定表达融合蛋白的哺乳动物细胞株；哺乳动物细胞株的培养液中提取具备膜外展示Catcher、膜内富集RNA能力的双功能外泌体。本发明突破传统外泌体修饰与RNA装载的局限性，提供了一种膜内外双向负载、通用且高效的外泌体工程化构建平台。

本发明授权基于双向负载模块的通用工程外泌体构建方法在权利要求书中公布了：1.基于双向负载模块的通用工程外泌体构建方法，其特征在于：包括以下步骤： 步骤S1：构建包括融合蛋白的编码基因的质粒表达载体； 所述融合蛋白包括：a：四次跨膜蛋白CD63，N端携带标签蛋白；b：插入至打开的四次跨膜蛋白CD63的第二胞外环中的SnoopCatcher，所述SnoopCatcher前后由柔性连接肽连接，C端携带标签蛋白；c：位于四次跨膜蛋白CD63的C端的结构模块，包括：i多聚碱性膜内锚定结构域；ii长度为10-20个氨基酸的柔性连接肽；iiiλ噬菌体来源的N-peptide结构域； 其中，所述四次跨膜蛋白CD63的编码基因序列如SEQIDNO.1所示，所述SnoopCatcher的编码基因序列如SEQIDNO.2所示，所述λ噬菌体来源的N-peptide结构域的编码基因如SEQIDNO.3所示，所述多聚碱性膜内锚定结构域由精氨酸、脯氨酸和赖氨酸残基组成，氨基酸序列如SEQIDNO.4所示，所述四次跨膜蛋白CD63的N端携带Flag标签蛋白，所述SnoopCatcher的C端携带Myc标签蛋白，所述柔性连接肽为Gly4Sern，n=2-4； 步骤S2：所述质粒表达载体包装慢病毒并纯化后导入哺乳动物细胞中，筛选获得稳定表达所述融合蛋白的哺乳动物细胞株； 步骤S3：所述哺乳动物细胞株的培养液中通过离心法提取具备膜外展示SnoopCatcher和膜内富集RNA能力的双功能外泌体，所述外泌体膜外通过SnoopCatcher与相应Tag标记的功能分子形成异肽键，实现共价连接；所述外泌体膜内通过N-peptide结构域，富集携带BoxB序列的目标mRNA分子。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人南昌大学第一附属医院，其通讯地址为：330000 江西省南昌市东湖区永外正街17号；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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