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龙图腾网获悉徐州富饶生物科技有限公司申请的专利一种布鲁氏杆菌分型检测试剂盒及其检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120505433B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-21发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510613418.8，技术领域涉及：C12Q1/689；该发明授权一种布鲁氏杆菌分型检测试剂盒及其检测方法是由吴庆刚;刘君;朱有森;白杨设计研发完成，并于2025-05-13向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种布鲁氏杆菌分型检测试剂盒及其检测方法在说明书摘要公布了：本发明涉及一种布鲁氏杆菌分型检测试剂盒及其检测方法，涉及生物检测技术领域，包括如下组分：反应液、检测液、酶混合液、定量标准品、分型标准品、空白对照品；所述反应液包含：5×PCRbuffer、50mMMgCl2、0.5MmdNTP、0.1‑0.3％vv表面活性剂、0.5‑2molL增强剂、1‑5％wv海藻糖、0.1‑1％wv的BSA、0.1‑1μgμLSSB、0.1‑1mMMnCl2。该试剂盒及其检测方法信号强度、复杂样本耐受性、检测灵敏度和特异性优异。

本发明授权一种布鲁氏杆菌分型检测试剂盒及其检测方法在权利要求书中公布了：1.一种布鲁氏杆菌分型检测试剂盒，其特征在于，包括如下组分：反应液、检测液、酶混合液、定量标准品、分型标准品、空白对照品；所述反应液包含：5×PCRbuffer、50mMMgCl2、0.5MmdNTP、0.1-0.3%vv表面活性剂、0.5-2molL增强剂、1-5%wv海藻糖、0.1-1%wv的BSA、0.1-1μgμLSSB、0.1-1mMMnCl2；所述表面活性剂为Tween-20；所述增强剂为甜菜碱；所述检测液包含：布鲁氏杆菌定量引物对和探针P0、牛布鲁氏杆菌扩增引物对和探针P1、羊布鲁氏杆菌扩增引物对和探针P2、猪布鲁氏杆菌扩增引物对和探针P3、犬布鲁氏杆菌扩增引物对和探针P4； 所述布鲁氏杆菌定量引物对包括上游引物F0和下游引物R0；所述牛布鲁氏杆菌扩增引物对包括上游引物F1和下游引物R1；所述羊布鲁氏杆菌扩增引物对包括上游引物F2和下游引物R2；所述猪布鲁氏杆菌扩增引物对包括上游引物F3和下游引物R3；所述犬布鲁氏杆菌扩增引物对包括上游引物F4和下游引物R4； 所述F0的序列为GATATTGGCAACCGAGCCAT，浓度为400nM；所述R0的序列为TATTATCCGATTGGTGGTCT，浓度为400nM；所述P0的序列为5’-荧光报告基团-GAAATCGCGTTCGCGAT-荧光淬灭基团-3’，5’端标记的荧光报告基团为ROXPLUS，3’端标记的荧光淬灭基团为BHQ1，浓度为80nM； 所述F1的序列为CACACTCACCTTCCACAACA，浓度为100nM；所述R1的序列为CCCGTTCTGCACCAGAC，浓度为500nM；所述P1的序列为5’-荧光报告基团-ACAAGGGTGGAACGACCTTTGCAGGC-荧光淬灭基团-3’，5’端标记的荧光报告基团为ROXPLUS，3’端标记的荧光淬灭基团为BHQ1，浓度为500nM； 所述F2的序列为TCGYATCGGCAGTTTCAA，浓度为120nM；所述R2的序列为CAGCTTTTGGCCTTTTCC，浓度为500nM；所述P2的序列为5’-荧光报告基团-CATGGCCCGCAATCTGGAAAAGG-荧光淬灭基团-3’，5’端标记的荧光报告基团为ROXPLUS，3’端标记的荧光淬灭基团为BHQ1，浓度为500nM； 所述F3的序列为CAAATATCCATGCGGGAAG，浓度为120nM；所述R3的序列为TGGGCATTCTCTACGGTG，浓度为650nM；所述P3的序列为5’-荧光报告基团-CCATAAAGCGCAAAGATCACACCGTAGAGA-荧光淬灭基团-3’，5’端标记的荧光报告基团为ROXPLUS，3’端标记的荧光淬灭基团为MGB，浓度为650nM； 所述F4的序列为GCACAGGCAGGCGA，浓度为100nM；所述R4的序列为GACATCACCGTTCACGC，浓度为500nM；所述P4的序列为5’-荧光报告基团-TCTATCTGGCCAAATATCGCGTGAACGGTGAT-荧光淬灭基团-3’，5’端标记的荧光报告基团为ROXPLUS，3’端标记的荧光淬灭基团为BHQ1，浓度为500nM； 所述布鲁氏杆菌定量检测靶标序列为：GATATTGGCAACCGAGCCATTCGACGAAACGGCCGTCGCGACGAGACCCGGCACGCCCTTTTCGCCTGCGCCGGAAATCGCGTTCGCGATCAGACCACCAATCGGATAATA； 所述牛布鲁氏杆菌检测靶标序列为：TTGCGAGCGGCAGCACGCTGCAGCTTGGCGATGGCAGCACGGATGGCAGGCTTGCGGGCAATGTGGCCAATGCGGGCACACTCACCTTCCACAACAAGGGTGGAACGACCTTTGCAGGCGAGATCTCCGGCACTGGCAGTCTGGTGCAGAACGGGGCGGGTGCACTGACGCTGAGCGGTGACAGCCAAGGTTTTGCCGGT； 所述羊布鲁氏杆菌检测靶标序列为：GGCGCGGTGTTGCCGAAAACGTGAAAGAAGCGGCGAAATGGTATCAGCTTGCCGCCGATCAGGGCTTTGCGCCTGCGCAATATCGCATCGGCAGTTTCAATGAAAAGGGCCTCGGCATGGCCCGCAATCTGGAAAAGGCCAAAAGCTGGTATCAGCTTGCCGCAGATCAGGGCAATGCAAGCGCCATGCACAATCTTGCCGTGCTTTTTGCCACAGGTACAAACGGCACGCCGGATAATGCTGCCGCTGT； 所述猪布鲁氏杆菌检测靶标序列为：TCCAAGGCCCGGTTGCAGCAGGAACCAGCCAGCCGCAATGGTCAATATGCCAAATATCCATGCGGGAAGGAAGATTGGGTTCGCAAACCATGCCGCGCCGCCATAAAGCGCAAAGATCACAAAAGCGCAAAGATCACACCGTAGAGAATGCCCACTGCATAGTGGCCGATCCAGCCCAGCGCCACTTCATGACGACAGGG； 所述犬布鲁氏杆菌检测靶标序列为：GATGAATTTCCGCAGGGCCGTAATGTTCACGGTGGCGGCCATCGGCCTTGCCGCCTCCCCGCTTTTCACTGCGCCGGCACAGGCAGGCGAGGCTCGCAAATCCAGAGAGGTCTATCTGGCCAAATATCGCGTGAACGGTGATGTCCGCTATTCCAAGCAGCCGAGAGGCAAACTGATGCGAGTTTCGGTCTCACAATATAGGACCAGCAATTCCTATGTCTGTACGCCAAGCGGCTTCGGCCAGAAATCG。

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