浙江默乐生物科技有限公司;江苏默乐生物科技股份有限公司何超超获国家专利权
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龙图腾网获悉浙江默乐生物科技有限公司;江苏默乐生物科技股份有限公司申请的专利一种检测生殖道病原微生物的引物探针组合、试剂盒及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119464524B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411664439.4,技术领域涉及:C12Q1/689;该发明授权一种检测生殖道病原微生物的引物探针组合、试剂盒及应用是由何超超;李杨霞;高娟;王先磊;严旭霞;王依莲;汪艺设计研发完成,并于2024-11-20向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种检测生殖道病原微生物的引物探针组合、试剂盒及应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种检测生殖道病原微生物的引物探针组合、试剂盒及应用,引物探针组合包括如SEQIDNO.1‑SEQIDNO.96所示引物探针序列,生殖道病原体包括微小脲原体、解脲脲原体、人型支原体、生殖支原体、白色念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、耳念珠菌、克柔念珠菌、都柏林念珠菌等27种可引起生殖道疾病的病原体以及卷曲乳杆菌、詹氏乳杆菌、加氏乳杆菌、惰性乳杆菌4种常见的阴道乳杆菌,还包括人源内标。基于荧光定量PCR技术,可用于体外样本同时检测27种可引起生殖道疾病的病原体及4种常见的阴道乳杆菌,不仅可以覆盖生殖道感染的主要病原体,同时满足对阴道生态环境的评估,检测时长缩短至40分钟左右,同时具有较好的特异性与灵敏度。
本发明授权一种检测生殖道病原微生物的引物探针组合、试剂盒及应用在权利要求书中公布了:1.引物探针组合在制备同时检测生殖道病原微生物及阴道生态环境评估的试剂盒中的应用,其特征在于,所述引物探针组合包括如SEQIDNO.1-SEQIDNO.96所示引物探针序列,所述引物探针组合分为8个引物探针大组:第一引物探针大组包括微小脲原体、解脲脲原体、人型支原体、生殖支原体的引物探针序列,如SEQIDNO.1-SEQIDNO.12所示,其中序号为2、5、8、11的序列为探针序列;第二引物探针大组包括白色念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、耳念珠菌的引物探针序列,如SEQIDNO.13-SEQIDNO.24所示,其中序号为14、17、20、23的序列为探针序列;第三引物探针大组包括克柔念珠菌、都柏林念珠菌、近平滑念珠菌、人源内标的引物探针序列,如SEQIDNO.25-SEQIDNO.33、SEQIDNO.94-SEQIDNO.96所示,其中序号为26、29、32、95的序列为探针序列;第四引物探针大组包括B族链球菌、细小棒状杆菌、亨氏巴尔通体、衣氏放线菌的引物探针序列,如SEQIDNO.34-SEQIDNO.45所示,其中序号为35、38、41、44的序列为探针序列;第五引物探针大组包括阴道毛滴虫、阿米巴原虫、淋病奈瑟氏菌、杜克雷嗜血杆菌的引物探针序列,如SEQIDNO.46-SEQIDNO.57所示,其中序号为47、50、53、56的序列为探针序列;第六引物探针大组包括沙眼衣原体、单纯疱疹病毒II型、单纯疱疹病毒I型、梅毒螺旋体的引物探针序列,如SEQIDNO.58-SEQIDNO.69所示的序列,其中序号为59、62、65、68的序列为探针序列;第七引物探针大组包括卷曲乳杆菌、詹氏乳杆菌、加氏乳杆菌、惰性乳杆菌的引物探针序列,如SEQIDNO.70-SEQIDNO.81所示,其中序号为71、74、77、80的序列为探针序列;第八引物探针大组包括双歧杆菌、阴道阿托波氏菌、阴道加德纳菌、纤毛菌的引物探针序列,如SEQIDNO.83-SEQIDNO.93所示,其中序号为83、86、89、92的序列为探针序列; 应用包括如下步骤: 1将引物探针组合中的引物探针进行稀释; 2根据第一引物探针大组至第八引物探针大组分别配制生殖道病原体及人源内标的引物探针工作液; 3配制PCR反应体系,加样本后进行荧光PCR检测; 所述反应体系中,PCR缓和液与引物探针工作液的体积比2:1;PCR反应程序为:50℃5min,95℃2min,95℃3s54℃5s,5个循环,95℃3s58℃5s,40个循环; 检测结果判断标准为:所述人源内标的Ct值≤31,否则认为PCR反应无效,需要重新进行检测;其他各靶标对应的Ct值≤36,且扩增曲线为典型S型曲线时,判为对应病原微生物阳性。
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