安徽科技学院钱晶晶获国家专利权
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龙图腾网获悉安徽科技学院申请的专利通过体胚发生技术两步法培育获得基因编辑石榴的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119614628B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411429997.2,技术领域涉及:C12N15/84;该发明授权通过体胚发生技术两步法培育获得基因编辑石榴的方法是由钱晶晶;唐静雯;王宁;伍程程;葛伟强设计研发完成,并于2024-10-14向国家知识产权局提交的专利申请。
本通过体胚发生技术两步法培育获得基因编辑石榴的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了通过体胚发生技术两步法培育获得基因编辑石榴的方法,包括材料获得、胚性愈伤组织的获得、农杆菌菌液制备、愈伤组织的预培养、侵染、共培养、清洗、选择培养、继代培养和试管外生根等步骤。本发明首次以石榴茎段作为外植体建立石榴基因编辑植株体系,并获得石榴基因编辑植株,避免以石榴种子下胚轴作为外植体出现的子代性状分离的现象,可为后续石榴基因功能、良种培育等研究,奠定良好基础;此外本发明在已建立的石榴体胚发生的基础上,再次细化在Kan和TMT的选择压力下的体胚发生条件,利用体胚的两极性的特性,直接转化胚性细胞从而获得石榴完整、稳定的基因编辑植株,转化率高。
本发明授权通过体胚发生技术两步法培育获得基因编辑石榴的方法在权利要求书中公布了:1.通过体胚发生技术两步法培育获得基因编辑石榴的方法,其特征在于,方法步骤如下: S1:将石榴的茎尖生长点接种于初代培养基中培养20-25d; S2:将S1培养后的幼嫩植株的茎段去除生长点,并接种于愈伤组织诱导培养基中培养20-25d; S3:将农杆菌菌液在液体培养基中进行培养,待菌液OD600=0.6-0.8后,经离心,收集菌体,用侵染液重悬菌体至菌液状态,室温孵育后备用; S4:将选取S2中淡绿色颗粒状、生长旺盛的愈伤组织接种于预培养培养基中培养2-3d; S5:将S3的重悬后的农杆菌菌液加入侵染液中,然后将S4中预培养后的受体材料放入侵染液进行侵染; S6:将侵染后的受体材料于共培养培养基中进行培养; S7:对共培养后的受体材料进行清洗并于选择培养基中进行培养; S8:将选择培养后的受体材料的体胚接种至继代培养基中培养10-15d; S9:将S8继代培养后的植株进行试管外生根,成活后移栽即得基因编辑石榴; S1中初代培养基为WPM+0.7-0.9mgL6-BA+5.5gL琼脂+20-25gL蔗糖+0.4-0.6gL活性炭; S2中愈伤组织诱导培养基为MS+0.5mgL6-BA+1.0-1.5mgLNAA+5.5gL琼脂+20-30gL蔗糖; S4中预培养培养基为MS+0.45-0.55mgL6-BA+0.5-0.6mgLNAA+5.5gL琼脂+20-30gL蔗糖; S5中侵染液为MS+0.45-0.55mgL6-BA+0.5-0.6mgLNAA+200μmolLAS+20-30gL蔗糖; S6中共培养培养基为MS+0.45-0.55mgL6-BA+0.5-0.6mgLNAA+200μmolLAS+5.5gL琼脂+20-30gL蔗糖; S7中选择培养基为MS+0.45-0.55mgL6-BA+0.5-0.6mgLNAA+50mgLKan+200mgLTMT+5.5gL琼脂+20-30gL蔗糖; S8中继代培养基为WPM+50mgLKan+200mgLTMT+6gL琼脂+20-30gL蔗糖。
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