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华南农业大学孙永学获国家专利权

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龙图腾网获悉华南农业大学申请的专利一种基于离心柱法的针对噬菌体核酸提取方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119639734B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411773629.X,技术领域涉及:C12N15/10;该发明授权一种基于离心柱法的针对噬菌体核酸提取方法是由孙永学;王雪;李馥琳;张俊炫;冯枫琳;魏欣宇;何晓露;王椰凡设计研发完成,并于2024-12-05向国家知识产权局提交的专利申请。

一种基于离心柱法的针对噬菌体核酸提取方法在说明书摘要公布了:本发明涉及一种基于离心柱法的针对噬菌体核酸提取方法,包括尿素裂解、变性、吸附、漂洗等步骤。本发明通过利用高浓度尿素能够解开包涵体结构进行变性纯化的技术原理,利用含尿素的变性裂解液破坏噬菌体衣壳蛋白暴露内部核酸,并基于离心柱法进行噬菌体核酸提取,与商品化病毒核酸提取试剂盒相比,具有简单高效的优势,且较为经济便捷,可在45分钟内完成核酸提取。

本发明授权一种基于离心柱法的针对噬菌体核酸提取方法在权利要求书中公布了:1.一种基于离心柱法的针对噬菌体核酸提取方法,其特征在于:该方法包括以下步骤: 1取1mL噬菌体富集液,与等体积变性裂解液颠倒混匀,室温静置3min;所述的噬菌体富集液的制备:5mL宿主菌-噬菌体过夜培养物,4℃,5000rmin离心15min,取上清液过0.22μm滤膜即得;所述的变性裂解液的配置:Tris30-50mmolL、NaCl500mmolL、尿素6-8molL,在1000mL去离子水中充分溶解,使用盐酸调节pH至7.5即得; 2取1.6mL变性缓冲液,与上一步溶液混合,温和上下翻转6~10次,室温放置5min后,4℃,13000rmin离心10min,小心取上清;所述的变性缓冲液的配置:醋酸钾3molL、醋酸5molL,补加去离子水至1000mL即得; 3将上一步上清液放入核酸吸附柱,静置2min后,4℃,12000rmin离心2min,弃去废液,若液体较多可分次加入; 4向吸附柱中加入600μL漂洗液,4℃,12000rmin离心1min,弃去废液;所述的漂洗液的配置:Tris10mmolL,使用200mL去离子水充分溶解,使用盐酸调节pH至7.5,使用前补加800mL无水乙醇即得; 5重复步骤4一次; 6将吸附柱在4℃,12000rmin条件离心2min,打开盖子,室温放置5min以去除漂洗液残余; 7将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加50μL灭菌去离子水,室温放置5min,4℃,12000rmin离心1min; 8离心所得洗脱液再次放入一个新的吸附柱,室温放置2min,4℃,12000rmin离心2min,即可获得噬菌体基因组DNA。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人华南农业大学,其通讯地址为:510000 广东省广州市天河区五山;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。

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