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龙图腾网获悉成都生物制品研究所有限责任公司申请的专利一种减毒的百日咳鲍特菌重组菌株及其构建方法和应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120624499B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-28发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202511147428.3，技术领域涉及：C12N15/74；该发明授权一种减毒的百日咳鲍特菌重组菌株及其构建方法和应用是由周觉非;李春阳;姬林瑄;张泽龙;冯晓帆;马源;李应伟;张珂;刘威;葛永红设计研发完成，并于2025-08-15向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种减毒的百日咳鲍特菌重组菌株及其构建方法和应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种减毒的百日咳鲍特菌重组菌株及其构建方法和应用，属于微生物基因工程技术领域。本发明提供了一种减毒百日咳鲍特菌重组菌株，本发明重组菌株表达的基因脱毒百日咳毒素与野生型相比，毒性降低106倍，而且在小鼠攻毒实验中首次证明源于百日咳鲍特菌CS株改造的基因脱毒百日咳毒素具有良好的保护性，可以用于制备治疗或和检测或和预防百日咳疾病的产品，具有良好的应用前景。

本发明授权一种减毒的百日咳鲍特菌重组菌株及其构建方法和应用在权利要求书中公布了：1.一种百日咳鲍特菌CS株重组菌株的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括以下步骤： 1构建包含百日咳毒素S1亚基基因的上下游同源重组臂的敲除质粒pJZ-G-UD和包含百日咳毒素S1亚基基因的上下游同源重组臂以及百日咳毒素S1亚基双位点突变基因的敲入质粒pJZ-G-mS1； 所述敲除质粒pJZ-G-UD的结构为质粒复制起点p15Aori-质粒转移起点oriT-sacB启动子-sacB-抗性基因-galk启动子-galk-lac启动子-上游5’同源臂-下游3’同源臂，其中，抗性基因和质粒复制起点p15Aori的方向与质粒上其他基因相反； 所述敲入质粒pJZ-G-mS1的结构为质粒复制起点p15Aori-质粒转移起点oriT-sacB启动子-sacB-抗性基因-galk启动子-Galk-lac启动子-上游5’同源臂-百日咳毒素S1亚基双位点突变基因-下游3’同源臂，其中，抗性基因和质粒复制起点p15Aori的方向与质粒上其他基因相反； 所述S1亚基双位点突变基因为R9KE129G； 所述抗性基因为庆大霉素抗性基因GmR； 所述敲除质粒pJZ-G-UD的核苷酸序列为SEQIDNo.3，敲入质粒pJZ-G-mS1的核苷酸序列为SEQIDNo.4； 2制备野生型百日咳鲍特菌CS株感受态细胞； 3将步骤1构建的敲除质粒pJZ-G-UD转化至步骤2所得野生型百日咳鲍特菌CS株感受态细胞，复苏，依次经正向筛选、反向筛选，得到百日咳毒素S1亚基基因缺失的百日咳鲍特菌CS株重组菌株ΔS1株； 4制备百日咳鲍特菌CS株重组菌ΔS1株感受态细胞； 5将步骤1构建的敲入质粒pJZ-G-mS1转化至步骤4所得百日咳鲍特菌CS株重组菌ΔS1株感受态细胞，复苏，依次经正向筛选、反向筛选，得到S1亚基双位点突变的百日咳鲍特菌CS株重组菌株。

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