国科温州研究院(温州生物材料与工程研究所)王志刚获国家专利权
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龙图腾网获悉国科温州研究院(温州生物材料与工程研究所)申请的专利一种流体样本中单个细胞外囊泡上聚糖的分析方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119290714B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-05发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411453466.7,技术领域涉及:G01N15/1404;该发明授权一种流体样本中单个细胞外囊泡上聚糖的分析方法是由王志刚;闫宇飞;杨根设计研发完成,并于2024-10-17向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种流体样本中单个细胞外囊泡上聚糖的分析方法在说明书摘要公布了:本发明属于生物技术领域,具体涉及一种流体样本中单个细胞外囊泡上聚糖的分析方法。该方法使用磁性纳米颗粒对EV进行捕获与操纵,基于凝集素对特定聚糖结构的特异性亲和作用,利用多分散微液滴对被捕获的EV进行单个分隔,通过酶促反应实现液滴内局部信号放大,采用荧光显微镜对液滴进行图像采集,从而实现单个EV上聚糖组分的识别与分析。本发明的振荡乳化法形成微液滴的制备过程使整个检测流程更加简便快捷,无需任何微流控芯片及特殊装置,在离心管中即可完成,同时所有微液滴平行、快速生成,微液滴量可灵活扩展。而且与传统ELISA相比,本发明方法灵敏度高,检测限低,样品消耗量小。
本发明授权一种流体样本中单个细胞外囊泡上聚糖的分析方法在权利要求书中公布了:1.一种分析流体样本中单个细胞外囊泡聚糖的方法,其特征在于, 包括以下步骤: S1:将含EV颗粒的流体样本与功能化磁性纳米颗粒混合,得MNP@PDA-EV复合体; 所述功能化磁性纳米颗粒的制备方法包括以下步骤: 取1.6克三氯化铁、3克醋酸钠、0.6克柠檬酸钠、1毫升水溶于50毫升乙二醇,充分混合后,在180℃下反应12小时,得到磁性纳米颗粒;在超声分散辅助下,将3毫克磁性纳米颗粒分散于100毫升水中,而后依次加入100毫克多巴胺、1毫升28%氨水,充分混合后室温静置反应4小时,得到功能化磁性纳米颗粒; S1中,所述含EV颗粒的流体样本中EV颗粒与功能化磁性纳米颗粒的质量比为0.005~0.1:1; S2:封闭处理MNP@PDA-EV复合体,之后与生物素偶联的凝集素混合,得到生物素化EV,链霉亲和素偶联的酶分子与所述生物素化EV特异性结合,得到酶联免疫吸附的纳米复合物; S2中,所述封闭、混合后还包括固液分离、清洗的步骤; S3:将酶联免疫吸附的纳米复合物与底物溶液、油相液体混合,制备多分散液滴; S3中,所述多分散液滴的制备方法包括振荡、搅拌、吹打、撞击、超声中的一种或多种组合; S4:光学信号检测; 所述方法为非疾病诊断和治疗目的。
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