华中农业大学于永耀获国家专利权
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龙图腾网获悉华中农业大学申请的专利IgZ基因敲除斑马鱼黏膜免疫抗体缺失模型构建方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119699270B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-05发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411403528.3,技术领域涉及:C12N15/113;该发明授权IgZ基因敲除斑马鱼黏膜免疫抗体缺失模型构建方法及应用是由于永耀;赵旭阳;秘琮然;任子卉;叶嘉文设计研发完成,并于2024-10-09向国家知识产权局提交的专利申请。
本IgZ基因敲除斑马鱼黏膜免疫抗体缺失模型构建方法及应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种IgZ基因敲除斑马鱼黏膜免疫抗体缺失模型构建方法及应用,属于基因工程技术领域。该模型构建方法包括如下步骤:S1、以如SEQIDNO:1所示的核苷酸序列为靶点,利用基因编辑系统对斑马鱼的胚胎进行IgZ基因敲除,得到IgZ基因敲除的F0代突变体斑马鱼;S2、将F0代突变体斑马鱼与靶型相同的突变体斑马鱼自交,经测序得到IgZ基因突变的F1代纯合子突变体斑马鱼,即为IgZ基因敲除斑马鱼黏膜免疫抗体缺失模型。本发明首次构建得到斑马鱼黏膜免疫球蛋白合成障碍模型,该模型在快速筛选及评价具有缓解黏膜炎症的药物及天然功效因子中具有较好的应用价值。
本发明授权IgZ基因敲除斑马鱼黏膜免疫抗体缺失模型构建方法及应用在权利要求书中公布了:1.一种IgZ基因敲除斑马鱼黏膜免疫抗体缺失模型构建方法,其特征在于,包括如下步骤: S1、以如SEQIDNO:1所示的核苷酸序列为靶点,利用基因编辑系统对斑马鱼的胚胎进行IgZ基因敲除,得到IgZ基因敲除的F0代突变体斑马鱼; S2、将所述F0代突变体斑马鱼与靶型相同的突变体斑马鱼自交,经测序得到IgZ基因突变的F1代纯合子突变体斑马鱼,即为IgZ基因敲除斑马鱼黏膜免疫抗体缺失模型; 步骤S1中,所述基因编辑系统为CRISPRCas9系统; 所述CRISPRCas9系统使用的gRNA的制备方法包括:合成用于扩增gRNA转录模板的引物;使用所述引物,并以pMD19T-gRNA质粒为模板进行PCR反应,所得PCR产物经纯化后,使用T7转录酶进行体外转录,得到gRNA; 所述引物包括正向引物和反向引物,所述正向引物的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示,所述反向引物的核苷酸序列如SEQIDNO:3所示。
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