浙江大学程军获国家专利权
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龙图腾网获悉浙江大学申请的专利一种改良关键酶促进裸藻降解苯酚增强固碳的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119875986B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-05发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411956559.1,技术领域涉及:C12N1/36;该发明授权一种改良关键酶促进裸藻降解苯酚增强固碳的方法是由程军;郭洳含;杨卫娟;刘建忠;周俊虎;岑可法设计研发完成,并于2024-12-29向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种改良关键酶促进裸藻降解苯酚增强固碳的方法在说明书摘要公布了:本发明微藻降解苯酚及固碳技术,旨在提供一种改良关键酶促进裸藻降解苯酚增强固碳的方法。包括:通过对裸藻细胞进行苯酚浓度梯度驯化,调整裸藻细胞中的H+转运ATP酶、丙酮酸脱羧酶、异柠檬酸脱氢酶这三个关键酶的基因表达量;对裸藻驯化株进行扩大培养生长,在培养基中加入适量苯酚,并持续通入含有CO2的气体;在培养过程中通过测定藻液的生物质中的碳元素含量计算裸藻的固碳速率;培养结束后,测定单位体积藻液中的裸藻多糖含量,并测定藻液中苯酚含量用于计算苯酚的降解率。本发明采用苯酚浓度梯度驯化裸藻细胞,提高关键酶基因表达量数倍,在增强裸藻细胞苯酚降解能力的同时提高了其固碳速率,还能同时提高细胞内多糖含量。
本发明授权一种改良关键酶促进裸藻降解苯酚增强固碳的方法在权利要求书中公布了:1.一种改良关键酶促进裸藻降解苯酚增强固碳的方法,其特征在于,包括以下步骤: 1通过对裸藻细胞进行苯酚浓度梯度驯化,调整裸藻细胞中的H+转运ATP酶PMA、丙酮酸脱羧酶、异柠檬酸脱氢酶这三个关键酶的基因表达量,使其分别提高到原始表达量的7.0~8.2倍、4.3~5.5倍、3.1~4.2倍: 所述苯酚浓度梯度驯化具体包括:将裸藻藻种以10%的接种量接种到培养基中,添加苯酚使其浓度为5~8mgL;培养5天后取出藻液,以10%的接种量进行转接到新的培养基中,且添加苯酚使其浓度为13~16mgL;培养5天后取出藻液,以10%的接种量进行转接到新的培养基中,且添加苯酚使其浓度为22~28mgL;培养5天后取出藻液,以10%的接种量进行转接到新的培养基中,且添加苯酚使其浓度为22~28mgL,在此条件下传代培养3代以上,最终获得性状稳定的苯酚高效降解裸藻驯化株; 在驯化过程中始终设置若干个平行组,每次转接培养后都需通过转录组学测定各组裸藻中三个关键酶的基因表达量;将转录组测序获得的所有转录本与数据库进行比对,进行裸藻驯化株与原始株组间差异基因分析;选择基因表达量最优一组进行下一步的转接培养,最终使三个关键酶的基因表达量调整至所述范围; 2对裸藻驯化株进行扩大培养生长,在培养基中加入适量苯酚,并持续通入含有CO2的气体;在培养过程中的第三天和第四天分别采集藻液样品,通过测定生物质中的碳元素含量计算裸藻的固碳速率; 在裸藻培养过程中使用标准CM培养基,培养基中的苯酚浓度为22~28mgL;控制气体中的CO2体积浓度为3~20%,培养时的温度条件为20~25℃,光照条件为80~100μmolm-2s-1; 3培养结束后,测定单位体积藻液中的裸藻多糖含量,并测定藻液中苯酚含量用于计算苯酚的降解率。
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