新疆农业大学张桦获国家专利权
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龙图腾网获悉新疆农业大学申请的专利一种病毒诱导的沉默梭梭基因的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119955849B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-05发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510213482.7,技术领域涉及:C12N15/84;该发明授权一种病毒诱导的沉默梭梭基因的方法是由张桦;桑世博;李俐;程聪;张枫源;谌能双;孙朗;任燕萍;马丽;王波设计研发完成,并于2025-02-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种病毒诱导的沉默梭梭基因的方法在说明书摘要公布了:本发明涉及基因工程技术领域,尤其涉及一种病毒诱导的沉默梭梭基因的方法。本发明提供一种病毒诱导的沉默梭梭基因的方法,包括VIGS载体的构建、农杆菌转化以及制备转染用菌液和病毒匀浆侵染梭梭植株等步骤。以烟草脆裂病毒改造后的病毒载体建立梭梭基因沉默体系,病毒匀浆介导的基因沉默更快更高效,沉默后梭梭HaCLA1基因表达量显著降低。本发明首次将VIGS基因沉默技术在梭梭中实际应用,建立了一套高效的梭梭基因沉默体系,可在短时间内高效沉默植物的目的基因,操作简便、高效,实验周期短且成本低。同时,HaCLA1基因可以作为梭梭基因沉默的报告基因,构建的载体pTRV2‑HaCLA1可以作为梭梭基因沉默的阳性载体。
本发明授权一种病毒诱导的沉默梭梭基因的方法在权利要求书中公布了:1.一种病毒诱导的沉默梭梭基因的方法,其特征在于,包括以下步骤: S1、VIGS载体构建: S11、提取梭梭总RNA并反转录为cDNA,以梭梭cDNA为模板扩增核苷酸序列如SEQIDNO:1所示的HaCLA1片段; S12、双酶切制备pTRV2线性化载体; S13、通过DNA胶回收试剂盒回收目的片段HaCLA1和pTRV2线性化载体; S14、重组目的片段HaCLA1和pTRV2线性化载体,得到重组产物连接重组反应液; S15、重组产物反应液转化DH5α大肠杆菌感受态细胞,得到重组载体pTRV2-HaCLA1; S2、重组载体转化农杆菌:提取pTRV1、pTRV2-HaCLA1质粒并将其分别转入融化的GV3101农杆菌感受态中,筛选阳性克隆菌,得到pTRV1和pTRV2-HaCLA1的GV3101农杆菌菌株; S3、侵染梭梭: S31、制备转染用菌液; S32、利用烟草扩增病毒匀浆侵染梭梭。
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