浙江大学徐非非获国家专利权
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龙图腾网获悉浙江大学申请的专利一种基于TurboID邻近标记技术鉴定水稻胚乳内互作蛋白的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120064661B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-05发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510177499.1,技术领域涉及:G01N33/68;该发明授权一种基于TurboID邻近标记技术鉴定水稻胚乳内互作蛋白的方法是由徐非非;李新宇;包劲松;潘建名;李萌设计研发完成,并于2025-02-18向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于TurboID邻近标记技术鉴定水稻胚乳内互作蛋白的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于TurboID邻近标记技术鉴定水稻胚乳内互作蛋白的方法,属于生物技术领域。所述方法包括:首先将目的蛋白与TurboID生物素连接酶形成融合蛋白,构建稳定表达融合蛋白的转基因水稻植株;再将转基因植株开花后7‑9天的发育种子与浓度为100‑400μM的生物素溶液混合,抽真空处理10‑30min后放置8‑36h;然后取生物素处理后的水稻胚乳样品进行蛋白提取、富集、质谱鉴定水稻胚乳内生物素标记的互作蛋白。本发明提供了一种基于TurboID系统在水稻胚乳内对目的蛋白质进行了临近空间标记的方法,利用该方法可以用于解析其可能存在的蛋白质‑蛋白质相互作用。
本发明授权一种基于TurboID邻近标记技术鉴定水稻胚乳内互作蛋白的方法在权利要求书中公布了:1.一种基于TurboID邻近标记技术鉴定水稻胚乳内互作蛋白的方法,其特征在于,包括以下步骤: 1将目的蛋白与TurboID生物素连接酶形成的融合蛋白的编码基因克隆到植物表达载体中构建重组质粒,所述目的蛋白与TurboID生物素连接酶之间由柔性Linker连接,目的蛋白融合于TurboID生物素连接酶的N端,所述融合蛋白中Linker-3×HA-TurboID-6×His编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示;再利用农杆菌介导的遗传转化法转基因到水稻受体中,获得融合蛋白成功表达的转基因植株; 2将转基因植株开花后7-9天的发育种子与浓度为200-400μM的生物素溶液混合,抽真空处理10-30min后放置12-36h; 3取生物素处理后的水稻胚乳样品进行蛋白提取、富集、质谱鉴定水稻胚乳内生物素标记的互作蛋白。
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