佛山市妇幼保健院张世林获国家专利权
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龙图腾网获悉佛山市妇幼保健院申请的专利一种基于尿道干细胞膜片ECM与外泌体的复合水凝胶及其制备方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120679004B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-05发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510849926.6,技术领域涉及:A61L27/36;该发明授权一种基于尿道干细胞膜片ECM与外泌体的复合水凝胶及其制备方法及应用是由张世林;李杰荣;李春景;何军;谢旭敏设计研发完成,并于2025-06-24向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于尿道干细胞膜片ECM与外泌体的复合水凝胶及其制备方法及应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于尿道干细胞膜片ECM与外泌体的复合水凝胶及其制备方法及应用,将尿道干细胞膜片脱细胞基质ECM粉末溶化酶解后得到的可溶性ECM蛋白溶液与外泌体按3:1‑10:1的质量比例混合,在DMEM中,pH7.0、36‑38℃下进行温敏性交联,形成水凝胶,基于尿道干细胞膜片脱细胞基质ECM与外泌体,通过整合尿道干细胞膜片的细胞活性、脱细胞基质ECM的结构支撑作用和外泌体的信号调控作用,构建三级功能体系,形成协同修复作用,有助于促进尿道中的血管新生;通过脱细胞基质ECM纤维网络与外泌体表面蛋白的共价偶联,实现外泌体在炎症环境下的智能释放,用于尿道修复,促进血管新生。
本发明授权一种基于尿道干细胞膜片ECM与外泌体的复合水凝胶及其制备方法及应用在权利要求书中公布了:1.一种基于尿道干细胞膜片脱细胞基质与外泌体的复合水凝胶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:将尿道干细胞膜片脱细胞基质粉末溶化酶解后得到的可溶性ECM蛋白溶液与外泌体按3:1-10:1的质量比混合,在DMEM中,pH7.0、36-38℃下进行温敏性交联,形成水凝胶;所述尿道干细胞膜片脱细胞基质粉末的制备包括以下步骤: 1细胞获取与培养:取尿道组织样本,胶原酶消化获得原代干细胞,接种于培养瓶中,37℃、5%CO2培养箱中培养,每2天换液一次,待细胞达到80%融合度后传代; 23D微载体扩增:将细胞以5×104cellscm²的接种密度接种于3DTableTrix微载体上,置于动态培养系统中,搅拌速率为15rpm,间歇搅拌模式5min开30min停,培养7天,期间每2天更换一半培养基; 3转2D培养形成膜片:将微载体上的细胞收集,接种于2D培养皿中,37℃、5%CO2培养箱中培养,每2天换液一次,待细胞形成膜片; 4脱细胞处理:将细胞膜片冻融循环3次,随后在含0.5%TritonX-100和0.1MNH4OH的溶液中4℃处理过夜,再用DNA酶和RNA酶37℃处理1小时,最后进行临界点干燥,冻干粉碎后过400目筛,得到ECM粉末。
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