陕西科技大学徐秦峰获国家专利权
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龙图腾网获悉陕西科技大学申请的专利一种DNA长度的熔解测定方法及试剂盒获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN114774526B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-12发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210436554.0,技术领域涉及:C12Q1/686;该发明授权一种DNA长度的熔解测定方法及试剂盒是由徐秦峰;贺晓玲;蒲改平;王芳;刘楠;杨雨昕设计研发完成,并于2022-04-25向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种DNA长度的熔解测定方法及试剂盒在说明书摘要公布了:本发明为一种DNA长度的熔解测定方法及试剂盒,其克服了现有技术中存在的当目标DNA的熔解温度相近时,无法依据熔解温度区分多个目标DNA的问题。本发明测定方法更加简单快速,可广泛用于基于核酸分析的食品真实性鉴定、医疗诊断等领域,具有较强的实际应用价值。本发明通过加入小分子季铵盐消除GC含量对熔解温度的影响,建立了荧光标记和非标记荧光熔解测定DNA长度的两种方法。利用加入以上3种添加剂后的熔解温度以及计算得到GC%两种方式测定未知DNA的长度。实现了DNA水解切割反应监测的应用,并将多重PCR和熔解测定长度方法结合检测了乳及乳制品中牛、山羊、绵羊三种动物源性成分。
本发明授权一种DNA长度的熔解测定方法及试剂盒在权利要求书中公布了:1.一种DNA长度的熔解测定方法,其特征在于:包括以下步骤: 1通过对DNA样品加入四甲基氯化铵或四乙基氯化铵或甜菜碱添加剂消除GC含量对熔解温度的影响; 2建立不同添加剂对应的熔解温度和长度的标准曲线以及GC含量和加与不加添加剂的熔解温度差的标准曲线; 3对于未知长度的DNA加入四甲基氯化铵或四乙基氯化铵或甜菜碱添加剂进行熔解,读取对应熔解温度带入两种标准曲线计算DNA长度; 4对于DNA酶水解反应产物长度的测定,将四甲基氯化铵或四乙基氯化铵或甜菜碱添加剂加入DNA酶水解反应产物中,读取对应熔解温度带入两种标准曲线计算DNA水解产物长度; 5对于PCR产物长度的测定通过设计对应PCR引物获得扩增子,将四甲基氯化铵或四乙基氯化铵或甜菜碱添加剂加入PCR产物中,读取对应熔解温度带入两种标准曲线计算PCR产物长度; 6对于多重PCR产物区分及实际样品的检测,通过对比核苷酸序列及特异性检验,设计多对特异性PCR引物,对单重、双重及三重PCR扩增产物加入四甲基氯化铵或四乙基氯化铵或甜菜碱添加剂进行熔解区分;实际样品采集自新鲜乳、乳制品,经对比参考样品和待测样品熔解峰的位置进行鉴定检测。
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