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龙图腾网获悉江苏省农业科学院申请的专利一种农业用水中食源性致病微生物的富集方法及应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114672537B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-19发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210269849.3，技术领域涉及：C12Q1/24；该发明授权一种农业用水中食源性致病微生物的富集方法及应用是由谢雅晶;刘贤金;王少萌;李丹地;杜雪飞;李彬;何鑫;徐重新;刘媛;张存政;孙永刚;刘敏设计研发完成，并于2022-03-18向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种农业用水中食源性致病微生物的富集方法及应用在说明书摘要公布了：本发明提供了一种农业用水中食源性致病微生物的富集方法及应用，属于食源性致病微生物检测技术领域。所述富集方法是将预处理的农业用水经滤膜抽滤；将所述截留有微生物的滤膜进行洗脱，所得洗脱液分离，所得固相为膜细菌组分，所得液相为含膜病毒组分的溶液；将滤膜滤液经切向流过滤器处理获得切向流过滤病毒组分。本发明所述方法可对水样中多种致病细菌和食源性病毒同时进行富集、分离，缩短富集处理时间，食源性病毒回收率最高可达62.60％，致病菌回收率最高可达94.24％，可有效富集多种常见致病细菌、食源性病毒和冠状病毒，配合高通量测序技术或实时荧光定量PCR检测技术在快速检测农业用水中食源性致病微生物中的应用。

本发明授权一种农业用水中食源性致病微生物的富集方法及应用在权利要求书中公布了：1.一种农业用水中食源性致病微生物的富集方法，其特征在于，包括以下步骤： 1将预处理的农业用水经滤膜抽滤，得到截留有微生物的滤膜和滤膜滤液；滤膜抽滤包括依次采用大孔径滤膜、小孔径滤膜过滤； 所述大孔径滤膜为孔径0.45~0.8μm的滤膜； 所述小孔径滤膜为孔径0.2μm的滤膜； 2将步骤1中所述截留有微生物的滤膜进行洗脱，所得洗脱液经固液分离，所得固相为膜细菌组分，所得液相为膜病毒组分； 所述洗脱用溶液为第一洗脱缓冲液；所述第一洗脱缓冲液包括以下浓度的组分：牛肉粉10~15gL、Tris-Base0.1~0.2molL、甘氨酸0.05~0.1molL； 3将步骤1中所述滤膜滤液经切向流过滤器处理，获得切向流过滤的病毒组分； 切向流过滤器处理依次包括切向流过滤器浓缩和洗脱；切向流过滤器处理中负压的压力为1.5～2.0MPa； 所述洗脱用溶液为第二洗脱缓冲液；所述第二洗脱缓冲液包括以下浓度的组分：牛肉粉20~30gL、Tris-Base0.2~0.4molL、甘氨酸0.1~0.2molL； 将膜病毒组分的溶液或所述切向流过滤的病毒组分进行病毒沉淀，得到食源性病毒； 步骤2和步骤3之间没有时间顺序的限制； 步骤2中所述分离为离心，所述离心的转速为3000~6000×g，所述离心的时间为5~10min； 步骤2中所述病毒沉淀的方法依次包括PEG沉淀试剂处理和固液分离； 所述PEG沉淀试剂包括以下浓度的水溶液：PEG-80008~200gL、氯化钠17.5~37.4gL；所述PEG沉淀试剂的处理时间为1~12h； 所述PEG沉淀试剂的处理温度为3~5℃； 所述固液分离包括离心；所述离心的转速为4500~8000rpm，所述离心的时间为30~120min。

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