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龙图腾网获悉苏州齐禾生科生物科技有限公司申请的专利一种基于双生病毒初级及次级复制子的定向进化方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115516089B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-19发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202180033728.2，技术领域涉及：C12N15/10；该发明授权一种基于双生病毒初级及次级复制子的定向进化方法是由高彩霞;祝皓诚设计研发完成，并于2021-03-30向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于双生病毒初级及次级复制子的定向进化方法在说明书摘要公布了：提供了一种基于双生病毒的定向进化方法，该方法是利用双生病毒初级及次级复制子在植物细胞内对于遗传学元件进行体内筛选的定向进化方法。

本发明授权一种基于双生病毒初级及次级复制子的定向进化方法在权利要求书中公布了：1.一种对遗传学元件进行定向进化以获得具有期望的功能的所述遗传学元件突变体的方法，所述方法包括： i提供所述遗传学元件的突变体的文库，其包含遗传学元件的多个突变体，所述遗传学元件的多个突变体分别被插入包含双生病毒复制子的载体；所述突变体被插入至双生病毒复制子内，由此当所述双生病毒复制子复制时，所述突变体被扩增， ii用所述文库转化植物细胞的群体，和 iii培养所述植物细胞的群体，检测并选择在所述植物细胞的群体中被富集的遗传学元件突变体； 其中，具有所述期望的功能的遗传学元件突变体的双生病毒复制子在植物细胞中的复制水平高于不具有所述期望的功能的遗传学元件突变体的双生病毒复制子在植物细胞中的复制水平； 其中，所述方法符合以下i-iii任一项： i所述包含双生病毒复制子的载体包含双生病毒Rep和RepA蛋白的表达盒；或者 ii所述包含双生病毒复制子的载体包含双生病毒Rep或RepA蛋白的表达盒，并且所述方法还包括向所述植物细胞导入用于表达双生病毒Rep或RepA蛋白另一者的载体，所述用于表达双生病毒Rep或RepA蛋白另一者的载体与所述文库一起共转化所述植物细胞的群体；或者，所述植物细胞已经包含用于表达双生病毒Rep或RepA蛋白另一者的载体，或所述植物细胞的基因组已经整合有双生病毒Rep或RepA蛋白另一者的表达盒；或者 iii所述包含双生病毒复制子的载体不包含双生病毒Rep和RepA蛋白的表达盒，并且所述方法还包括向所述植物细胞导入用于表达双生病毒Rep和RepA蛋白的其他载体，所述用于表达双生病毒Rep和RepA蛋白的其他载体与所述文库一起共转化所述植物细胞的群体；或者，所述植物细胞已经包含用于表达双生病毒Rep和RepA蛋白的其他载体，或所述植物细胞的基因组已经整合有双生病毒Rep或RepA蛋白的其他表达盒；并且 所述包含双生病毒复制子的载体还包含至少一个LIR，至少一个SIR； 所述双生病毒属于玉米线条病毒属；所述遗传学元件衍生自植物，或者期望应用于植物； 所述遗传学元件选自蛋白质编码序列、功能RNA编码序列、或表达调控序列；并且 所述植物是单子叶植物或双子叶植物。

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