福建师范大学柯崇榕获国家专利权
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龙图腾网获悉福建师范大学申请的专利高效转化葡萄糖生产四氢嘧啶重组菌的构建方法及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115612694B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-19发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202110802743.0,技术领域涉及:C12N15/70;该发明授权高效转化葡萄糖生产四氢嘧啶重组菌的构建方法及其应用是由柯崇榕;黄建忠;杨欣伟;韩剑;丁灵涛;陈永涛;陶勇设计研发完成,并于2021-07-15向国家知识产权局提交的专利申请。
本高效转化葡萄糖生产四氢嘧啶重组菌的构建方法及其应用在说明书摘要公布了:本发明公开高效转化葡萄糖生产四氢嘧啶重组菌的构建方法及应用,重组菌是根据四氢嘧啶的生物合成途径,平衡磷酸烯醇式丙酮酸到草酰乙酸和丙酮酸的碳代谢流分配构建出的以葡萄糖为底物直接发酵生产四氢嘧啶的重组菌株,56小时发酵液中能够积累36‑53gL四氢嘧啶,单位细胞的产率达到1.21‑1.91ggDCW,葡萄糖摩尔转化率达到0.31‑0.38molmol,产量、产率和转化率均高于现有工艺;本发明提供的重组菌用于发酵产四氢嘧啶的过程控制与现有的发酵法和全细胞催化法生产四氢嘧啶盐工艺相比,原料成本较低,培养条件简单,设备损耗小,发酵周期短,操作简便,无需收集菌体提取酶液,四氢嘧啶生产效率较高。
本发明授权高效转化葡萄糖生产四氢嘧啶重组菌的构建方法及其应用在权利要求书中公布了:1.高效转化葡萄糖生产四氢嘧啶重组菌的构建方法,其特征在于:将二氨基丁酸氨基转移酶、二氨基丁酸乙酰基转移酶和四氢嘧啶合成酶的编码基因通过重组载体导入受体菌得到用于产四氢嘧啶的重组菌;所述受体菌为突变型大肠杆菌; 所述二氨基丁酸氨基转移酶基因编码氨基酸序列为SEQIDNo.1的蛋白质; 所述二氨基丁酸乙酰基转移酶基因编码氨基酸序列为SEQIDNo.2的蛋白质; 所述四氢嘧啶合成酶基因编码氨基酸序列为SEQIDNo.3的蛋白质; 所述突变型大肠杆菌为对野生型大肠杆菌进行下述基因改造得到的所述野生型大肠杆菌的突变体: 将丙酮酸激酶I基因pykF敲除或将丙酮酸激酶II基因pykA敲除,所述丙酮酸激酶I基因pykF编码氨基酸序列SEQIDNo.4所示的蛋白质,所述丙酮酸激酶II基因pykA编码氨基酸序列SEQIDNo.5所示的蛋白质; 以及,所述突变型大肠杆菌中还进行下述基因改造: 将二氨基庚二酸脱羧酶基因替换为谷氨酸脱氢酶基因,所述二氨基庚二酸脱羧酶基因编码氨基酸序列为SEQIDNo.8的蛋白质,所述谷氨酸脱氢酶基因编码氨基酸序列为SEQIDNo.9的蛋白质; 和或,将L-天冬氨酸激酶高丝氨酸脱氢酶双功能酶I基因截短得到突变体I基因或将L-天冬氨酸激酶高丝氨酸脱氢酶双功能酶II基因截短得到突变体II基因,所述突变体I基因编码氨基酸序列为SEQIDNo.6的蛋白质,所述突变体II基因编码氨基酸序列为SEQIDNo.7的蛋白质。
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