佛山科学技术学院李智丽获国家专利权
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龙图腾网获悉佛山科学技术学院申请的专利一种猪小肠组织外泌体及其分离纯化方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115786241B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-19发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211662895.6,技术领域涉及:C12N5/071;该发明授权一种猪小肠组织外泌体及其分离纯化方法和应用是由李智丽;苏朗驹;张琬玓;郭锦玥;池仕红;黄宗洋设计研发完成,并于2022-12-23向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种猪小肠组织外泌体及其分离纯化方法和应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种猪小肠组织外泌体及其分离纯化方法和应用,其中所述猪小肠组织外泌体具有抗猪流行性腹泻病毒作用,其分离纯化包括以下步骤:S1:用PBS缓冲液清洗组织,然后取出肠道内容物和粘膜,切成组织片段;S2:将组织片段浸入含有胶原酶的HBSS缓冲液中,随后置于冰上以结束酶促消化并获得酶解产物;S3:将酶解产物匀浆后使用40μm过滤器过滤到新鲜管中,然后对滤液进行三次离心;S4:第三次离心获得的上清液通过外泌露收集纯化系统进行纯化,得到高纯度外泌体。本发明提供的猪小肠组织外泌体具有明显的抗猪流行性腹泻病毒作用,能够用于制备预防治疗针对该病毒的药物,对未来猪流行性腹泻的防控具有重要的意义。
本发明授权一种猪小肠组织外泌体及其分离纯化方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种猪小肠组织外泌体在制备抗猪流行性腹泻病毒药物中的应用,其特征在于,所述猪小肠组织外泌体的分离纯化方法,包括以下步骤: S1:用PBS缓冲液清洗组织,然后取出肠道内容物和粘膜,切成组织片段; S2:将组织片段浸入含有胶原酶的HBSS缓冲液中,在37℃水浴锅水浴30min,随后置于冰上以结束酶促消化并获得酶解产物; S3:将酶解产物匀浆后使用40μm过滤器过滤到新鲜管中,然后对滤液进行第一次离心,第一次离心结束后清除细胞碎片,转移上清液并进行第二次离心,第二次离心获得的上清液使用0.22μmPVDF过滤器进行过滤,然后对滤液进行第三次离心;第一次离心的条件为:1000×g离心10min;第二次离心的温度为4℃,依次进行:2000×g离心20min,5000×g离心30min,15000×g离心1h;第三次离心的温度为4℃,120000×g离心2h; S4:第三次离心获得的上清液通过外泌露收集纯化系统进行纯化,得到高纯度外泌体。
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