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龙图腾网获悉河南福森药业有限公司申请的专利一种双黄连中药组合物的指纹图谱检测方法及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117054547B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-19发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310981481.8，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权一种双黄连中药组合物的指纹图谱检测方法及其应用是由曹智铭;孙万阳;何蓉蓉;孙国祥;陈承瑜;李怡芳;高嘉莹;高进;欧阳淑桦;陈新星;关建丽设计研发完成，并于2023-08-04向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种双黄连中药组合物的指纹图谱检测方法及其应用在说明书摘要公布了：本发明属于中药技术领域，公开了一种双黄连中药组合物的指纹图谱检测方法及其应用。该指纹图谱检测方法如下：以高效液相色谱分析供试品溶液和对照品溶液；并采用指纹图谱软件处理色图谱得到指纹图谱；液相色谱分析中，采用流动相进行梯度洗脱，流动相为：A相包括磷酸水溶液，B相包括乙腈和甲醇。该指纹图谱检测方法能够在不同检测波长下标定出至少22个色谱峰，并指认出连翘酯苷E、绿原酸、咖啡酸等10种有效成分，同时对多成分定量分析；该指纹图谱检测方法能够使各批次药物具有稳定、可靠的治疗效果。通过本发明质量控制筛选出的具备特定活性成分含量特征的双黄连中药组合物，能够用于制备降低流感易感性的药物。

本发明授权一种双黄连中药组合物的指纹图谱检测方法及其应用在权利要求书中公布了：1.一种双黄连中药组合物的指纹图谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤： 制备双黄连中药组合物的供试品溶液：取黄芩375重量份加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩并在80℃时加入2molL盐酸溶液适量调节pH值至1.0～2.0，保温1小时，静置12小时，滤过，沉淀加6～8倍量水，用40%氢氧化钠溶液调节pH值至7.0，再加等体积份乙醇，搅拌使溶解，滤过，滤液用2molL盐酸溶液调节pH值至2.0,60℃保温30分钟，静置12小时，滤过，沉淀用乙醇洗至pH值为7.0，回收乙醇备用；取金银花375重量份、连翘750重量份加水温浸30分钟后，煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至70～80℃下相对密度为1.20～1.25的清膏，冷至40℃时缓缓加入乙醇，使含醇量达75%，充分搅拌，静置12小时，滤取上清液，残渣加75%乙醇适量，搅匀，静置12小时，滤过，合并乙醇液，回收乙醇至无醇味，加入上述黄芩提取物，并加水适量，以40%氢氧化钠溶液调节pH值至7.0，搅匀，4～8℃冷藏72小时，滤过，滤液加入蔗糖300重量份，搅拌使溶解，再加入香精适量，调节pH值至7.0，加水制成1000体积份，搅匀静置12小时，滤过，灌装，灭菌，即得双黄连中药组合物；体积份重量份与mlg对应；称取所述双黄连中药组合物2.5mL，置20mL量瓶中，定容，过0.45μm滤膜，制得双黄连中药组合物的供试品溶液； 制备对照品溶液：取连翘酯苷E、绿原酸、咖啡酸、连翘酯苷I、连翘酯苷A、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、黄芩苷、连翘苷，溶于溶剂中，制得对照品混合溶液； 将所述供试品溶液和所述对照品溶液进行高效液相色谱分析，得到双黄连中药组合物的色图谱和对照品的色谱图； 采用指纹图谱软件处理所述双黄连中药组合物和所述对照品的色图谱，得到双黄连中药组合物指纹图谱； 在所述高效液相色谱分析中，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；采用流动相进行梯度洗脱，所述流动相为：A相包括0.05%～0.25%磷酸水溶液和摩尔浓度为0.0025～0.01molL庚烷磺酸盐，B相包括乙腈和甲醇，所述乙腈与所述甲醇的体积比为8～10：1； 所述梯度洗脱的过程为： 0～5min，所述流动相中B相的体积百分比由4%～6%升至8%～10%； 5～10min，所述流动相中B相的体积百分比由8%～10%升至11%～12%； 10～12min，所述流动相中B相的体积百分比由11%～12%升至14%～16%； 12～20min，所述流动相中B相的体积百分比由14%～16%升至18%～20%； 20～25min，所述流动相中B相的体积百分比由18%～20%升至21%～22%； 25～30min，所述流动相中B相的体积百分比由21%～22%升至24%～27%； 30～45min，所述流动相中B相的体积百分比由24%～27%升至30%～34%； 45～50min，所述流动相中B相的体积百分比由30%～34%升至43%～48%； 50～55min，所述流动相中B相的体积百分比由43%～48%降至4%～6%； 在所述高效液相色谱分析中，检测波长为220nm、326nm。

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