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龙图腾网获悉中国农业科学院蔬菜花卉研究所申请的专利一种在大叶绣球中病毒诱导的基因沉默方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119464371B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-19发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411672365.9，技术领域涉及：C12N15/83；该发明授权一种在大叶绣球中病毒诱导的基因沉默方法是由袁素霞;范又维;刘春;杨琪钰;罗淑文设计研发完成，并于2024-11-21向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种在大叶绣球中病毒诱导的基因沉默方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种在大叶绣球中病毒诱导的基因沉默技术，属于绣球基因功能研究技术领域。包括以下步骤：1克隆HmPDS、HmF3'5'H和HmCHS1基因的全长片段；2分别构建HmPDS、HmF3'5'H和HmCHS1的TRV载体，转化大肠杆菌和农杆菌；3农杆菌侵染大叶绣球材料；4侵染后培养大叶绣球。本发明提供一种在大叶绣球中病毒诱导的基因沉默技术，以大叶绣球栽培种‘无尽夏’为材料，分别对组培苗和花头进行侵染。本发明公开的基因瞬时沉默的方法能够有效对绣球中的相关基因进行沉默，有助于提高基因功能研究效率。

本发明授权一种在大叶绣球中病毒诱导的基因沉默方法在权利要求书中公布了：1.一种在大叶绣球中病毒诱导的基因沉默方法，其特征在于，包括以下步骤： 1克隆HmPDS、HmF3'5'H和HmCHS1基因的全长片段； 2分别构建HmPDS、HmF3'5'H和HmCHS1的TRV载体，转化大肠杆菌和农杆菌； 所述分别构建HmPDS、HmF3'5'H和HmCHS1的TRV载体的步骤包括： 使用限制酶EcoRI和KpnI对pTRV2载体进行酶切； 使用SEQIDNO.7～8所示引物扩增HmPDS基因的沉默片段； 使用SEQIDNO.9～10所示引物扩增HmCHS1基因的沉默片段； 使用SEQIDNO.11～12所示引物扩增HmF3'5'H基因的沉默片段； 使用IIOneStepCloningKit进行HmPDS、HmCHS1和HmF3'5'H基因的沉默片段的连接，构建到pTRV2载体中，得到pTRV2-HmPDS、pTRV2-HmCHS1和pTRV2-HmF3'5'H三种重组质粒； 3农杆菌侵染大叶绣球材料；所述农杆菌侵染大叶绣球材料的步骤包括： 将阳性单克隆根瘤农杆菌菌株在含抗生素的液体LB培养基中，在28℃以180rpm摇床培养16小时，直到OD600在0.8～1.2，离心收集根瘤农杆菌细胞，使用pH5.6的侵染溶液重悬至OD600为1.5，在25℃黑暗中孵育3h后侵染大叶绣球材料；所述侵染溶液包含10mMMgCl2、10mM2-N-吗啉乙磺酸和200μM乙酰丁香酮； 4侵染后培养大叶绣球； 所述克隆HmPDS、HmF3'5'H和HmCHS1基因的全长片段的步骤包括： 利用SEQIDNO.1～2所示引物扩增HmPDS基因的全长片段； 利用SEQIDNO.3～4所示引物扩增HmCHS1基因的全长片段； 利用SEQIDNO.5～6所示引物扩增HmF3'5'H基因的全长片段。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人中国农业科学院蔬菜花卉研究所，其通讯地址为：100081 北京市海淀区中关村南大街12号；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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