之江实验室丰媛媛获国家专利权
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龙图腾网获悉之江实验室申请的专利一种前间区序列邻近基序的鉴定方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116083536B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-23发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310173577.1,技术领域涉及:C12Q1/6837;该发明授权一种前间区序列邻近基序的鉴定方法是由丰媛媛;石军超;马培翔;罗昀昀;朱世强;黄行许设计研发完成,并于2023-02-17向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种前间区序列邻近基序的鉴定方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种前间区序列邻近基序的鉴定方法,涉及生物技术领域。本发明利用CRISP‑Cas蛋白的核酸切割活性,在体外利用带有256种PAM序列的DNA阵列检测CRISP‑Cas蛋白对不同PAM序列的特异性,能够清晰展示CRISP‑Cas蛋白对每种PAM序列的识别偏好性。同时,本发明步骤简单、操作简便、无需测序、检测时间短,可以作为CRISP‑Cas蛋白的通用检测方法。
本发明授权一种前间区序列邻近基序的鉴定方法在权利要求书中公布了:1.一种前间区序列邻近基序的鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤: 1合成检测阵列引物对: 所述检测阵列引物对的序列中含有连续4bp的碱基N,其中,N为A、C、G或T;每一种确定的序列为阵列的检测点; 所述检测阵列引物对为以下至少一种: aEMX1-F:ggggcctcctgagNNNNtcatctgtgcccctccctccctggcccaggtgaaggtg, EMX1-R:caccttcacctgggccagggagggaggggcacagatgaNNNNctcaggaggcccc; bMerS_F:ccattagtctctcNNNNgacatatggaaaacgaactatgttaccctttgtccaag, MerS_R:cttggacaaagggtaacatagttcgttttccatatgtcNNNNgagagactaatgg; cDNMT1_F:cagtacgttaatgNNNNctgatggtccatgtctgttactcgcctgtcaagtggcg, DNMT1_R:cgccacttgacaggcgagtaacagacatggaccatcagNNNNcattaacgtactg; deGFP-1_F:cttgtggccgNNNNcgtcgccgtccagctcgaccaggatgggcaccaccccggtg, eGFP-1_R:caccggggtggtgcccatcctggtcgagctggacggcgacgNNNNcggccacaag; eeGFP-3_F:cgttggggtcNNNNctcagggcggactgggtgctcaggtagtggttgtcgggcag, eGFP-3_R:ctgcccgacaaccactacctgagcacccagtccgccctgagNNNNgaccccaacg; fFANCF_F:ctacttccgcNNNNaccttggagacggcgactctctgcgtactgattggaacatc, FANCF_R:gatgttccaatcagtacgcagagagtcgccgtctccaaggtNNNNgcggaagtag; 2合成短链DNA检测阵列: 将步骤1中合成的检测阵列引物对退火获得短链DNA检测阵列; 3PAM鉴定: 步骤2获得的短链DNA检测阵列、Cpf1蛋白、单链DNA报告基因和crRNA组成鉴定体系,孵育反应后测量鉴定体系荧光值; 还包括将步骤3中短链DNA检测阵列测量结果取平均值,并进行归一化处理。
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