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北京大学王初获国家专利权

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龙图腾网获悉北京大学申请的专利一种快速高效的化学蛋白质组学样品制备方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116337567B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-23发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310247865.7,技术领域涉及:G01N1/28;该发明授权一种快速高效的化学蛋白质组学样品制备方法是由王初;肖伟弟;陈颖;张锦;郭志昊设计研发完成,并于2023-03-15向国家知识产权局提交的专利申请。

一种快速高效的化学蛋白质组学样品制备方法在说明书摘要公布了:本申请公开了一种快速高效的化学蛋白质组学样品制备方法,涉及蛋白质组学领域,设计并合成了一种表面包被有可切割linker化合物的琼脂糖微球,可切割linker化合物的自由端含有叠氮基团,与现有炔基探针具有较好的兼容性。通过一步高效的点击化学反应,可以将探针标记肽段特异性地捕获到琼脂糖微球表面,由于琼脂糖微球与肽段之间是共价连接,可以使用非常强的变性剂或者表面活性剂对介质进行洗杂,以尽可能地除去非特异性吸附,最后通过切割处理就可以高效地将探针标记肽段从琼脂糖微球上解离下来。本发明中的样品制备方法将繁琐的“点击化学和链霉亲和素富集”简化为一步快速的“点击化学”反应,极大简化的操作流程。

本发明授权一种快速高效的化学蛋白质组学样品制备方法在权利要求书中公布了:1.一种快速高效的化学蛋白质组学样品制备方法,其特征在于,包含如下步骤: S1、全细胞裂解液中加入炔基探针进行标记,标记后的全细胞裂解液中加入甲醇氯仿沉淀蛋白,离心弃上清; S2、将蛋白沉淀物用预冷甲醇洗涤后,采用含SDS的磷酸盐缓冲液重悬,再加入二硫苏糖醇反应得混合液一; S3、混合液一中加入碘乙酰胺避光反应得混合液二; S4、混合液二中加入甲醇氯仿进行沉淀,沉淀物用预冷甲醇洗涤后,PBS重悬沉淀得炔基探针标记蛋白液; S5、向炔基探针标记蛋白液中加入富集微珠,通过CuAAC将炔基探针标记的蛋白质或肽段固定在富集微珠表面;所述富集微珠为包被有可切割化合物的微珠,所述可切割化合物包含可裂解基团,所述可裂解基团的一端连接有氨基,另一端连接有叠氮基团,所述可切割化合物通过氨基包被结合于富集微珠表面;所述叠氮基团与炔基探针中的炔基发生点击化学反应; S6、点击化学反应完成后离心弃上清,取富集微珠依次用尿素水溶液、PBS、水对富集微珠进行洗涤,洗涤后利用切割反应切断可裂解基团,将蛋白质或肽段从富集微珠上游离释放,切割反应完成后离心取上清,再将上清真空旋干即得蛋白质组学样品;所述切割反应为酸切反应或光切反应。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人北京大学,其通讯地址为:100871 北京市海淀区颐和园路5号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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