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龙图腾网获悉武汉华美生物工程有限公司申请的专利一种半合成纳米抗体库构建方法和纳米抗体库获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114775065B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-06发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210447689.7，技术领域涉及：C40B50/06；该发明授权一种半合成纳米抗体库构建方法和纳米抗体库是由罗绍祥;杨旭;高霞设计研发完成，并于2022-04-22向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种半合成纳米抗体库构建方法和纳米抗体库在说明书摘要公布了：本申请涉及抗体库构建技术领域，尤其涉及一种半合成纳米抗体库构建方法和纳米抗体库，所述方法包括：以CDR1、CDR2和CDR3的cDNA为模板，进行第一扩增，分别得到CDR1、CDR2和CDR3的碱基序列；将FR1、FR2、FR3和FR4的核苷酸序列与所述CDR1、所述CDR2和所述CDR3的碱基序列连接，并进行第二扩增，得到目的基因片段；将目的基因片段与第一载体连接，得到第二载体；将所述第二载体进行培养后筛选，得到含有纳米抗体库的目标载体，其中，所述目的基因片段的碱基序列连接关系包括：FR1‑CDR1‑FR2‑CDR2‑FR3‑CDR3‑FR4。通过FR1、FR2、FR3和FR4的抗体骨架与合成部分CDR区域，构建半合成的纳米抗体库，避免了现有纳米抗体需要通过抗原免疫接种获得，可用抗原直接筛选，快速获得人源纳米抗体，节省了成本和时间。

本发明授权一种半合成纳米抗体库构建方法和纳米抗体库在权利要求书中公布了：1.一种半合成纳米抗体库构建方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤： 分别得到CDR1、CDR2和CDR3的cDNA为模板； 分别得到FR1、FR2、FR3和FR4的核苷酸序列； 以CDR1、CDR2和CDR3的cDNA为模板，进行第一扩增，分别得到CDR1、CDR2和CDR3的碱基序列； 将FR1、FR2、FR3和FR4的核苷酸序列与所述CDR1、所述CDR2和所述CDR3的碱基序列连接，并进行第二扩增，得到目的基因片段； 将目的基因片段与第一载体连接，得到含有所述目的基因片段的第二载体； 将所述第二载体进行培养，以使所述目的基因片段表达为纳米抗体，后筛选，得到含有纳米抗体库的目标载体，其中，所述目的基因片段的碱基序列连接关系包括：FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4； 所述第一扩增用的第一引物包括：第一引物对、第二引物对和第三引物对；所述第一引物对包括第一上游引物F1和第一下游引物R1，用于扩增CDR1；所述第二引物对包括第一上游引物F2和第一下游引物R2，用于扩增CDR2；所述第三引物对包括第一上游引物F3和第一下游引物R3，用于扩增CDR3，F1、R1、F2、R2、F3和R3的碱基序列依次如SE.QIDNO：1-SEQIDNO：6所示； FR1、FR2、FR3和FR4的核苷酸序列依次如SEQIDNO：7-SEQIDNO：10所示； 所述第二扩增用的引物包括：第三引物对和第四引物对； 所述第三引物对包括F4和NNNR1，所述F4和NNNR1的碱基序列依次如SEQIDNO：15-SEQIDNO：16所示； 所述第四引物对包括F4’和NNNR2，所述F4’和NNNR2的碱基序列依次如SEQIDNO：17-SEQIDNO：18所示。

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