陕西科技大学吴瑕获国家专利权
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龙图腾网获悉陕西科技大学申请的专利一种调控重组核酸酶活性的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115851667B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-30发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310056693.5,技术领域涉及:C12N9/22;该发明授权一种调控重组核酸酶活性的方法是由吴瑕;刘志强;查健;刘志军设计研发完成,并于2023-01-17向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种调控重组核酸酶活性的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种调控重组核酸酶活性的方法,属于重组核酸酶技术领域。通过溶葡球菌酶Lst分别切割重组LbCas12a和LwCas13a核酸酶中富含甘氨酸的柔性连接肽Gly4‑84‑8和G44S1‑21‑2,释放出影响核酸酶活性的融合标签,成功提高了两种核酸酶的反式切割活性。溶葡球菌酶能够在较宽的温度4~50℃或者碱性pH值=7.0~10.0范围内发挥作用,并且耐受一定浓度的盐离子20~500mM。该方法能够填补当前技术手段的不足,为重组核酸酶研究提供一种新的、便捷的酶活调控工具。
本发明授权一种调控重组核酸酶活性的方法在权利要求书中公布了:1.一种正向调控重组核酸酶活性的方法,其特征在于,将带有组氨酸标签、助溶标签和富含甘氨酸柔性连接肽的核酸酶与溶葡球菌酶混合孵育,然后使用Ni2+亲和层析柱分离酶切混合物,流出镍柱的为移除标签的核酸酶,吸附在镍柱上的为切除的标签、溶葡球菌酶和未切割的核酸酶底物; 其中,所述核酸酶为重组LbCas12a和重组LwCas13a核酸酶,所述重组LbCas12a的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示,所述重组LwCas13a核酸酶的氨基酸序列如SEQIDNo.2所示,所述溶葡球菌酶的氨基酸序列如SEQIDNo.3所示。
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