武汉远赞吉诺百客医学科技有限公司李新平获国家专利权
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龙图腾网获悉武汉远赞吉诺百客医学科技有限公司申请的专利一种猪胰腺单细胞悬液制备方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116121172B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-30发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310242897.8,技术领域涉及:C12N5/071;该发明授权一种猪胰腺单细胞悬液制备方法及应用是由李新平;李泽卿;郑婷婷设计研发完成,并于2023-03-14向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种猪胰腺单细胞悬液制备方法及应用在说明书摘要公布了:本发明提出了一种猪胰腺单细胞悬液制备方法及应用,其中猪胰腺单细胞悬液制备方法包括如下步骤:S1,取猪胰腺组织,去除表面脂肪,并将组织剪碎;S2,清洗组织碎块,然后将组织放入混合酶解离液中进行第一次消化;S3,第一次消化结束后取上清液,管内剩余组织继续加入混合酶解离液进行第二次消化;S4,第二次消化结束后取上清液,并与步骤S3的上清液合并,过滤;S5,过滤后的解离液离心,弃上清液,重悬细胞沉淀,得到细胞悬液;所述混合酶解离液包括胰蛋白酶、胶原酶Ⅰ、弹性蛋白酶、脂肪酶、DNaseI、肝素、硫酸钠和DHanks缓冲液。本发明酶混合液具有去除细胞间质,减少细胞聚团,保护细胞膜形态,减少细胞破损的作用。
本发明授权一种猪胰腺单细胞悬液制备方法及应用在权利要求书中公布了:1.一种猪胰腺单细胞悬液制备方法,其特征在于:包括如下步骤: S1,取猪胰腺组织,去除表面脂肪,并将组织剪碎; S2,清洗组织碎块,然后将组织放入混合酶解离液中进行第一次消化; S3,第一次消化结束后取上清液,管内剩余组织继续加入混合酶解离液进行第二次消化; S4,第二次消化结束后取上清液,并与步骤S3的上清液合并,过筛; S5,过筛后的解离液离心,弃上清液,细胞沉淀经过两次清洗和离心后,DPBS溶液重悬细胞沉淀,得到细胞悬液; 所述混合酶解离液包括胰蛋白酶1-5mgmL、胶原酶Ⅰ0.5-3mgmL、弹性蛋白酶1-4mgmL、脂肪酶2-5mgmL、DNaseI8-12mgmL、肝素2-6UmL和硫酸钠3-6gL,溶剂为D-hanks缓冲液。
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