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龙图腾网获悉贵州中医药大学申请的专利一种黑龙骨茎叶质量测定方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118624750B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-30发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202410653893.3，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权一种黑龙骨茎叶质量测定方法是由刘育辰;刘刚;周玲利;穆开朗;彭乐强;冉飞设计研发完成，并于2024-05-24向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种黑龙骨茎叶质量测定方法在说明书摘要公布了：本发明公开了黑龙骨茎叶一种黑龙骨茎叶质量测定方法，所述方法包括指纹图谱建立及相似度分析、含量测定、结合聚类分析、主成分分析和偏最小二乘判别分析方法。本发明方法是对15批不同产地黑龙骨茎叶进行UPLC指纹图谱分析和相似度分析，发现共有28个共有峰，并用对照品指认其中7个共有峰，分别是峰4新绿原酸、峰8绿原酸、峰9咖啡酸、峰11隐绿原酸、峰22异槲皮苷、峰24紫云英苷、峰28异绿原酸C。本发明方法灵敏度高、专属性好，稳定可行，为黑龙骨茎叶质量评价及控制提供参考依据。

本发明授权一种黑龙骨茎叶质量测定方法在权利要求书中公布了：1.一种黑龙骨茎叶质量测定方法，其特征在于：黑龙骨茎叶质量测定方法包括指纹图谱建立、相似度分析、含量测定、聚类分析、主成分分析和偏最小二乘判别分析方法，具体的步骤如下： 1混合对照品溶液的制备：精密称取14.5-16.5mg新绿原酸、11.5-13.5mg绿原酸、11.5-13.5mg隐绿原酸置于10ml容量瓶中，加入75%乙醇溶液定容至刻度，摇匀，配制成混合对照品溶液①；另外精密称取2-4mg咖啡酸、4.5-6.5mg异槲皮苷、4-6mg紫云英苷、7.5-9.5mg异绿原酸C置于50mL容量瓶，加入75%乙醇至刻度，摇匀，配制成混合对照品溶液②；从混合对照品溶液①和混合对照品溶液②中各吸取1ml置于同一10ml的容量瓶中，加入75%乙醇溶液定容至刻度，摇匀，配制成混合对照品溶液③； 2供试品溶液的制备：精密称取黑龙骨茎叶样品0.4-0.6g，置于20ml锥形瓶中，加入75%乙醇10mL，精密称重，超声提取20-40min，放冷，补足失重，摇匀，过0.22μm微孔滤膜，即得供试品溶液； 3色谱条件：采用AgilentEclipsePlusC18色谱柱，色谱柱规格为2.1×100mm,1.8μm，体积流量0.2mLmin，乙腈为流动相B，0.1%磷酸水为流动相A，进行梯度洗脱，进样量0.8μL，柱温30℃，检测波长为1-49min，327nm；49-70min，254nm；70-85min，327nm； 洗脱梯度为0-9min，7-7.5%B；9-28min，7.5-9%B；28-31min，9-13%B；31-55min，13-13%B；55-60min，13-14%B；60-62min，14-16%B；62-67min，16-18%B；67-72min，18-18%B；72-75min，18-21.5%B；75-80min，21.5-65%B；80-85min，65-95%B； 4指纹图谱建立及相似度分析：将不同产地黑龙骨茎叶的供试品溶液分别在色谱条件下进行UPLC测定，将样品色谱图转换为AIA格式，数据导入2012版中药色谱指纹图谱相似度评价系统，将第一批次样品图谱作为参照图谱，时间窗宽设置为0.1，利用多点校正，经过marker峰匹配，生成黑龙骨茎叶指纹叠加图谱和对照图谱，并进行相似度计算，得到共有峰；再另取混合对照品溶液③在色谱条件下进样测定，得到对照品色谱图，通过对照品色谱峰及紫外吸收波长对比，指认特征峰，建立指纹图谱； 5含量测定：采用超高效液相色谱法，将供试品溶液和混合对照品溶液③分别在色谱条件下进行检测，有效分离黑龙骨茎叶中的新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异槲皮苷、紫云英苷和异绿原酸C，记录峰面积，并计算供试品中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异槲皮苷、紫云英苷和异绿原酸C的含量； 6结合聚类分析、主成分分析和偏最小二乘判别分析对不同产地黑龙骨茎叶进行分析。

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