中国肉类食品综合研究中心王守伟获国家专利权
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龙图腾网获悉中国肉类食品综合研究中心申请的专利一种用于工业化细胞解离的多酶制剂及其使用方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119530138B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-30发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411780860.1,技术领域涉及:C12N5/077;该发明授权一种用于工业化细胞解离的多酶制剂及其使用方法和应用是由王守伟;刘文婷;杨峰;郭晨;唐铎;祁宇;郭翔;刘屹森;赵鹏飞;胡海娟;李石磊;李莹莹;付周;李畅;任文佳;李宇轩设计研发完成,并于2024-12-05向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种用于工业化细胞解离的多酶制剂及其使用方法和应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种用于工业化细胞解离的多酶制剂及其使用方法和应用,属于工业化培育肉用种子细胞提取技术领域。本发明采用了由组分1和组分2组成的多酶制剂;组分1包括中性蛋白酶、透明质酸酶、弹性蛋白酶;组分2包括基质金属蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤溶酶。本发明也公开了制备多酶制剂配置方法以及应用。本发明合理的酶配比与优化的处理条件有助于保护细胞膜完整性,维持高细胞活性,显著提高解离效率和细胞回收量;复合酶制剂适应性强,可用于多种组织类型和解离需求,且便于标准化与规模化生产;结合自动化解离设备,复合酶制剂能够实现高效、稳定的工业化操作,为培育肉产业、组织工程和细胞治疗等领域提供了重要技术支撑和广阔的应用前景。
本发明授权一种用于工业化细胞解离的多酶制剂及其使用方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种用于工业化细胞解离的多酶制剂的使用方法,其特征在于: S1:配置组分1溶液和组分2溶液: 所述组分1溶液配置:在不含钙镁的PBS溶液中溶解中性蛋白酶、透明质酸酶、弹性蛋白酶; 所述组分2溶液配置:在含钙镁的Hanks溶液中溶解基质金属蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤溶酶; 在所述组分1中:所述中性蛋白酶浓度为0.7mgml,所述透明质酸酶浓度为0.4mgml,所述弹性蛋白酶浓度为0.3mgml; 在所述组分2中:所述基质金属蛋白酶浓度为0.3mgml,所述木瓜蛋白酶浓度为0.5mgml,所述纤溶酶浓度为0.5mgml; S2:制备目标酶解物:解剖12日龄鸡胚的肌肉组织;将所述肌肉组织预处理为0.5~1.0mm3小肉块; S3:组织初步消化解离:使用所述组分1溶液,酶解组织碎块,之后组织解离仪解离,获得组织初步消化解离液; S4:组织二次消化解离:在所述组织初步消化解离液中,再加组分2溶液,酶解二次消化,组织解离仪解离; S5:获得单细胞悬液:使用滤网过滤,收集上清液并离心,使用细胞培养基重悬。
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